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youcai147

铁杆木虫 (著名写手)


[交流] 【求助】EDC、NHS问题,非常急,谢谢

问题1:做羧基和氨基的交联反应,使用EDC/NHS的时候,使羧基活化,应先回EDC还是先加NHS? 
问题2:想使硫辛酸上的羧基活化,但是硫辛酸只在偏碱的水溶液中溶解,而我查到EDC只在pH 4.7-6.0有活性,请问下这种情况如何使硫辛酸的羧基活化?
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纳米粒子EDC蛋白偶联 酰胺键交联(EDC/NHS)

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youcai147(金币+10):谢谢,这个比例大约控制在多少,EDC/NHS,我看文献上用4:1 2010-12-05 12:20:08
wandaohzl:鼓励交流 2010-12-19 08:51:37
先加EDC,EDC只是说在4-6有较高活性,不是说超过这个范围就没有活性l,活性较低而已。在pH7.4左右进行活化,EDC多一点,NHS可以相对少点。
2楼2010-12-05 12:13:00
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youcai147(金币+10):谢谢了 2010-12-06 08:39:42
wandaohzl:鼓励交流 2010-12-19 08:51:45
EDC/NHS>=4:1, 先加EDC,反应10-15min,再加NHS,应该效果不错的。你自己先试试吧,祝好运!
3楼2010-12-05 13:44:35
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这不是酯化反应


wandaohzl(金币+1):鼓励交流 2010-12-19 08:51:55
这个不是酯化反应,酯化反应是指羧基与羟基结合,形成酯键-CO-O-。这个叫酰胺键,是羧基与氨基的成键反应,-CO-NH-。
这个是具体反应过程。
4楼2010-12-06 10:59:37
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djna644341

铜虫 (小有名气)


学习了
5楼2010-12-06 11:01:53
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liliwang2010

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by yuanzhiqin.119 at 2010-12-06 10:59:37:
这个不是酯化反应,酯化反应是指羧基与羟基结合,形成酯键-CO-O-。这个叫酰胺键,是羧基与氨基的成键反应,-CO-NH-。
这个是具体反应过程。

请问这个反应的条件是什么呀?谢谢!
6楼2010-12-17 17:43:39
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wandaohzl:鼓励交流 2010-12-19 08:52:04
引用回帖:
Originally posted by liliwang2010 at 2010-12-17 17:43:39:

请问这个反应的条件是什么呀?谢谢!

直接将羧基化合物与氨基化合物溶解在一起(一般在水里哈),将过量的EDC(1000:1)加入反应体系,反正便宜,反应十到十五分钟,加入250:1的NHS,在反应几个小时就可以了,你如果怕反应不完就过夜吧。

我觉得哈,你就不能去查查文献么,老是在论坛上求助,再说自己的实验不一样,还是要摸索条件滴。
7楼2010-12-18 21:29:06
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苏提拉

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by yuanzhiqin.119 at 2010-12-18 21:29:06:



直接将羧基化合物与氨基化合物溶解在一起(一般在水里哈),将过量的EDC(1000:1)加入反应体系,反正便宜,反应十到十五分钟,加入250:1的NHS,在反应几个小时就可以了,你如果怕反应不完就过夜吧。

我 ...

请问你买的EDC很便宜吗?在哪里买的,能提供一下信息吗?
8楼2010-12-19 14:43:26
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引用回帖:
Originally posted by 苏提拉 at 2010-12-19 14:43:26:

请问你买的EDC很便宜吗?在哪里买的,能提供一下信息吗?

普通的试剂代理商都有的,你就买这个就行了,Bio Basic Inc EB0433
9楼2010-12-20 22:19:41
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