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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

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性别: MM
专业: 生物化学

[求助] PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮是什么原因？已有9人参与

RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮，只有很浅的目的条带，但marker跑得挺好的，是什么原因呢？
麻烦见过这种现象的大神留下脚印，小女子不胜感激。

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喜欢生物，所以想好好研究下去！

1楼 2014-12-15 22:20:00

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wu-ke-da

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引用回帖:

20楼: Originally posted by gangouyang at 2014-12-17 23:57:19
重新合成cDNA吧。
初步判断可能是基因组污染了，因为从点样孔一直到目的条带出现严重拖尾，表明各种大小的片段都有。
建议：1.重新用试剂盒提取RNA，再合成cDNA。2.如果不想提RNA，那么合成cDNA的时候，DNaseI处理 ...

非常谢谢，琼脂糖凝胶电泳检测显示28s和18s条带的亮度差不多一样，这是不是说明RNA的质量不好，还有，我是用试剂盒合成cDNA的，根据说明书上的步骤，怎么没有加DNase I这一步骤呢？要是我想加DNase I的话，应该在哪一步加呢？