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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

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[求助] PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮是什么原因？已有9人参与

RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，泳道很亮，只有很浅的目的条带，但marker跑得挺好的，是什么原因呢？
麻烦见过这种现象的大神留下脚印，小女子不胜感激。

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喜欢生物，所以想好好研究下去！

1楼 2014-12-15 22:20:00

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gangouyang

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-18 22:39:47

重新合成cDNA吧。
初步判断可能是基因组污染了，因为从点样孔一直到目的条带出现严重拖尾，表明各种大小的片段都有。
建议：1.重新用试剂盒提取RNA，再合成cDNA。2.如果不想提RNA，那么合成cDNA的时候，DNaseI处理的时间要加长。3.合成cDNA的时候RNA多加一点。4.合成cDNA的时候42°C的时间如果1h不够，可以延长至1.5h或者2h。