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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 关于在流动相中加入三氟乙酸的问题
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欢子2046

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于在流动相中加入三氟乙酸的问题 已有7人参与

我想用液相分离蛋白。我看一些文献里边都有说要加入0.1%或者0.05%的三氟乙酸，但是这两浓度下pH值都很低，这样会不会破坏柱子？？
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好吧，生物学战士
1楼 2014-12-15 11:57:40
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李金杰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果你的柱子耐酸就没有问题，一般的色谱柱都可以耐这个浓度的酸，但要考虑到酸对你的蛋白有没有影响，因为你用液相分离后要浓缩，而三氟乙酸的沸点很高，要最后蒸干，随着液体的减少，三氟乙酸的浓度会越来越大，小心你的蛋白变性。这个浓度的酸对一般情况下的柱子是没有影响的。
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12楼2014-12-17 21:51:18
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欢子2046

铁虫 (初入文坛)
网上有帖子说加三乙胺调pH值，我想问有机相加三乙胺后也是用pH计测ph值嘛？
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好吧，生物学战士
2楼2014-12-15 11:59:06
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:33:57
加三氟乙酸主要是增加极性同时使走出的图谱峰型更规则。
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3楼2014-12-15 12:46:15
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欢子2046 at 2014-12-15 11:59:06
网上有帖子说加三乙胺调pH值，我想问有机相加三乙胺后也是用pH计测ph值嘛？

三乙胺是扫尾剂，柱子调料通常是键合硅胶，部分未被封端的游离硅醇基可与碱性物质结合，导致拖尾。流动相加三乙胺后，氨基与碱性物质竞争结合，抑制色谱峰拖尾而起到扫尾的作用
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微信公众号：Pharmaguider（药事纵横），主页：www.pharmaguider.cn
4楼2014-12-15 13:30:54
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