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season0906

铁虫 (初入文坛)

[求助] HIF蛋白提取 已有2人参与

我的实验需要提取细胞中的蛋白，做HIF的western检测，但是听说这个缺氧诱导因子有一些特殊要求，容易遇氧降解，请问下有没有前辈做过呢，能不能给指点一下？
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1楼 2014-12-14 14:19:22
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-16 11:33:17
蛋白降解不是氧能决定的，真正降解它的应该是蛋白酶，氧只不过是个引子，加蛋白酶抑制剂提取蛋白即可。
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年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
2楼2014-12-16 11:05:29
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巧笑倩兮12

铁虫 (初入文坛)
你好，我想咨询下HIF遇氧就降解的问题，最终你是怎么解决的，可否告知？谢谢！
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愿做一只自由翱翔的飞鹰！
3楼2015-06-04 09:03:36
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巧笑倩兮12

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-12-16 11:05:29
蛋白降解不是氧能决定的，真正降解它的应该是蛋白酶，氧只不过是个引子，加蛋白酶抑制剂提取蛋白即可。

加常用的PMSF蛋白酶抑制剂效果不大呢？
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愿做一只自由翱翔的飞鹰！
4楼2015-06-04 09:05:41
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jasmineyym

新虫 (初入文坛)
我也想知道最后问题解决了吗？

发自小木虫IOS客户端
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5楼2018-04-01 23:14:34
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wanghm200810

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

快速提蛋白，裂解液里加如还原剂DTT，加蛋白酶抑制剂，应该可以很好的解决这个问题，主要还得快，美国有一种柱式法蛋白提取方法，1分钟可以完成蛋白提取，你可以搜一下。
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Changeyoursciencespeed！
6楼2018-04-19 16:51:13
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