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蒲颇

铜虫 (小有名气)

[求助] SSR-PCR产物储藏问题 已有1人参与

我是做种群遗传结构研究的,用的是SSR-PCR产物做毛细管电泳检测其多态性,由于送样时要求至少是一块板子,所以我就想积累多一点PCR产物后再一起送测,请问SSR-PCR产物(带荧光标记)的储藏是怎样的?如果放4°保存,能储藏多长时间呢?同时,如果我把两种引物的PCR产物直接混在一起(分别含不同荧光染料标记),然后在做毛细管电泳与直接进行双重PCR(两种引物)的产物检测,这两种会有区别吗?谢谢
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duane

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-12 18:52:26
蒲颇: 金币+15, ★★★很有帮助 2014-12-14 19:39:08
可以放到20度 避光保存一周左右  
你可以多做一点样本 就好送样
如果两种荧光引物产物之间至少相差5bp-10bp的话  可以混到一起送样   最好用不同荧光标记
这样的话 就容易分辨结果
2楼2014-12-12 11:06:17
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duane

至尊木虫 (正式写手)

是零下20度  写错了
3楼2014-12-12 11:06:57
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蒲颇

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by duane at 2014-12-12 11:06:17
可以放到20度 避光保存一周左右  
你可以多做一点样本 就好送样
如果两种荧光引物产物之间至少相差5bp-10bp的话  可以混到一起送样   最好用不同荧光标记
这样的话 就容易分辨结果

因为我的量要很大,你知道做不同地理种群的遗传结构,所需样本量很大,所以想多积一点再送,我开始是放4°,现在是放-20保存的,大概放了3周左右了,请问会有多大的影响呢?
4楼2014-12-14 19:39:01
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duane

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
蒲颇: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-05-12 10:25:48
我觉得三周只要是避光应该没问题,PCR产物很稳定不容易降解而且还在零下20度的条件下

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2014-12-15 21:04:39
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秋雨默

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
麻烦请问,荧光引物设计时,选择不同的荧光标记集团还是选择双/多重荧光标记,后者价格是前者的两倍,我设计的引物扩增片段差异性不大,都是300bp左右
6楼2016-03-09 09:48:57
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秋雨默

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by duane at 2014-12-15 21:04:39
我觉得三周只要是避光应该没问题,PCR产物很稳定不容易降解而且还在零下20度的条件下

麻烦请问,荧光引物设计时,选择不同的荧光标记集团还是选择双/多重荧光标记,后者价格是前者的两倍,我设计的引物扩增片段差异性不大,都是300bp左右
7楼2016-03-09 09:55:09
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蒲颇

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋雨默 at 2016-03-09 09:55:09
麻烦请问,荧光引物设计时,选择不同的荧光标记集团还是选择双/多重荧光标记,后者价格是前者的两倍,我设计的引物扩增片段差异性不大,都是300bp左右...

如果你做双重或者多重PCR就选后者,如果你是普通PCR的话就选一个荧光标记就可以了
8楼2016-03-13 19:29:32
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