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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » SSR-PCR产物储藏问题
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蒲颇

铜虫 (小有名气)

[求助] SSR-PCR产物储藏问题 已有1人参与

我是做种群遗传结构研究的，用的是SSR-PCR产物做毛细管电泳检测其多态性，由于送样时要求至少是一块板子，所以我就想积累多一点PCR产物后再一起送测，请问SSR-PCR产物（带荧光标记）的储藏是怎样的？如果放4°保存，能储藏多长时间呢？同时，如果我把两种引物的PCR产物直接混在一起（分别含不同荧光染料标记），然后在做毛细管电泳与直接进行双重PCR（两种引物）的产物检测，这两种会有区别吗？谢谢
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秋雨默

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1楼 2014-12-11 21:33:41
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duane

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-12 18:52:26
蒲颇: 金币+15, ★★★很有帮助 2014-12-14 19:39:08
可以放到20度 避光保存一周左右  
你可以多做一点样本 就好送样
如果两种荧光引物产物之间至少相差5bp-10bp的话  可以混到一起送样   最好用不同荧光标记
这样的话 就容易分辨结果
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2楼2014-12-12 11:06:17
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duane

至尊木虫 (正式写手)
是零下20度  写错了
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3楼2014-12-12 11:06:57
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蒲颇

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by duane at 2014-12-12 11:06:17
可以放到20度 避光保存一周左右  
你可以多做一点样本 就好送样
如果两种荧光引物产物之间至少相差5bp-10bp的话  可以混到一起送样   最好用不同荧光标记
这样的话 就容易分辨结果

因为我的量要很大，你知道做不同地理种群的遗传结构，所需样本量很大，所以想多积一点再送，我开始是放4°，现在是放-20保存的，大概放了3周左右了，请问会有多大的影响呢？
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4楼2014-12-14 19:39:01
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duane

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
蒲颇: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-05-12 10:25:48
我觉得三周只要是避光应该没问题，PCR产物很稳定不容易降解而且还在零下20度的条件下
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秋雨默
5楼2014-12-15 21:04:39
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秋雨默

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
麻烦请问，荧光引物设计时，选择不同的荧光标记集团还是选择双/多重荧光标记，后者价格是前者的两倍，我设计的引物扩增片段差异性不大，都是300bp左右
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6楼2016-03-09 09:48:57
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秋雨默

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by duane at 2014-12-15 21:04:39
我觉得三周只要是避光应该没问题，PCR产物很稳定不容易降解而且还在零下20度的条件下

麻烦请问，荧光引物设计时，选择不同的荧光标记集团还是选择双/多重荧光标记，后者价格是前者的两倍，我设计的引物扩增片段差异性不大，都是300bp左右
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7楼2016-03-09 09:55:09
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蒲颇

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋雨默 at 2016-03-09 09:55:09
麻烦请问，荧光引物设计时，选择不同的荧光标记集团还是选择双/多重荧光标记，后者价格是前者的两倍，我设计的引物扩增片段差异性不大，都是300bp左右...

如果你做双重或者多重PCR就选后者，如果你是普通PCR的话就选一个荧光标记就可以了
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8楼2016-03-13 19:29:32
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