| 查看: 767 | 回复: 9 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
lybio金虫 (正式写手)
|
[交流]
连接体系中啥出问题了？
|
||
|
10ul连接体系： 载体 2.7ul（约50ng）先平端酶切，胶回收。后CIAP，用酚抽提，醇沉淀。 用灭菌，经55度预热的ddW溶解。 DNA片断 2.7ul（约100ng） 用pfu酶进行PCR（PCR产物是平端的）， 胶回收。与载体摩尔比约10:1 PEG8000 3.7ul（终浓度为15％） T4连接酶 buffer 1ul T4连接酶（宝生物） 1ul 16度反应16h，也试过用16度，22度，4度的不同温度循环反应。但就一直没连上，转化的大肠杆菌一个都没长，到底是哪出了问题？谢谢指教！ [ Last edited by lybio on 2008-5-22 at 19:47 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿北化求调剂
已经有4人回复
-
085601材料工程找调剂
已经有6人回复
-
318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂
已经有3人回复
-
一志愿双一流机械285分求调剂
已经有4人回复
-
332求调剂
已经有8人回复
-
一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂
已经有7人回复
-
一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。
已经有8人回复
-
375求调剂
已经有3人回复
-
南京大学化学调剂
已经有7人回复
-
070300化学354求调剂
已经有5人回复
5楼2008-05-22 08:29:44
humants
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 603.8
- 散金: 1
- 帖子: 609
- 在线: 6.9小时
- 虫号: 532996
- 注册: 2008-03-25
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
2楼2008-05-21 16:22:16
sailor7166262
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1035.6
- 帖子: 128
- 在线: 27.4小时
- 虫号: 328503
- 注册: 2007-03-21
- 性别: MM
- 专业: 食品
3楼2008-05-21 17:43:53
yangym1123
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1963.2
- 帖子: 230
- 在线: 30.2小时
- 虫号: 397777
- 注册: 2007-06-10
- 专业: 动物形态学及胚胎学
4楼2008-05-21 20:50:41
