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zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 884.6
帖子: 137
在线: 18.9小时
虫号: 262773
注册: 2006-07-01
性别: MM
专业: 色谱分析

[交流] 凝胶色谱柱保留时间漂移

本人一直使用凝胶色谱柱分析蛋白质,最近发现同一样品的保留时间延后6、7分钟出峰，不知是啥问题？希望能得到各位的帮助。

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1楼 2008-05-20 15:04:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

we-july

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 276.8
帖子: 120
在线: 1.1小时
虫号: 550530
注册: 2008-04-24
性别: MM
专业: 药学

★ ★ ★
dnp(金币+3,VIP+0):谢谢应助……^_^

凝胶色谱柱测蛋白的分子量，一般都用盐溶液或者乙腈水的三氟乙酸溶液作流动相。
出峰时间延迟，我觉得有这么几个可能：
1对应成分分子量变化－－比如水解等；看看你的标准品变化了没有，出峰时间是否异常。
2如果分离机理不光是分子筛原理，还有一些流动相极性分离的因素，那么流动相极性变化也能导致出峰时间变化。这方面可能性比较大。
3 柱子出问题了。不过一般柱效降低分离度上可以看出来。