应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 具有高活性的抗原和酶制备一般流程（体外诊断用）
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1011  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)

[求助] 具有高活性的抗原和酶制备一般流程（体外诊断用） 已有2人参与

最近在公司做几个项目关于抗原和酶，表达出来的蛋白活性很差（跟目前商业化的同类型蛋白相比），我们用的序列均是专利上提供的。请问下大神如何提高目的蛋白质的活性？谢谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-05 11:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个流程是标准的，不是每一步都做了质检
（1）表达细菌破碎后
（2）离心样品上柱前
（3）纯化后
（4）透析前
（5）老化试验（1天，1星期，一个月，半年，一年）
虽然很繁琐，但是如果每一步都能测出活性而且能够比较，就可以知道这些步骤中活性变化的情况，可以用来改进工艺流程。

还有，酶活只有别人的30%，这个结论是怎么来的？ 怎么测的酶活？ 如果加大3倍，能做到一样的活性吗？
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2014-12-07 15:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
huyan0817: 金币+1 2014-12-05 16:50:25
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-05 21:43:29
专利都是假的，不能信

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-12-05 13:39:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-05 21:43:37
问题太笼统，没有办法回答，

一个方法是纯化的每一步都测酶的活性

有可能是序列问题，有可能是表达条件问题，有可能是纯化问题，有可能是保存条件问题。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
3楼2014-12-05 21:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pennchem at 2014-12-05 21:32:42
问题太笼统，没有办法回答，

一个方法是纯化的每一步都测酶的活性

有可能是序列问题，有可能是表达条件问题，有可能是纯化问题，有可能是保存条件问题。

我是pET28表达系统，低温过夜诱导，超声破碎，然后亲和纯化，透析过夜，测浓度，电泳确定，最后用试剂盒测酶活。测出来的酶活很低只有别人的30%，有一个酶甚至一点酶活也没有。抗原的也是这个过程。总的来说我们自己弄的东西就是比市场上的差很多，目前就是没有一个具体的方法来做，都是大家自己乱搞，没有具体的一个可行性方案，这个是最大的问题；很多时候做了大量的工作就是没有成果。
赞一下 回复此楼
4楼2014-12-07 13:19:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕333求调剂 +10 北道巷 2026-03-24 10/500 2026-03-28 23:06 by 无际的草原
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 5/250 2026-03-28 21:26 by zhq0425
[考研] 332求调剂 +4 @MZB382400 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:02 by 唐沐儿
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +4 零八# 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:01 by 17865157980
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 4/200 2026-03-28 14:30 by QiMing7
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +15 hhhhxn.. 2026-03-23 21/1050 2026-03-28 11:26 by self2008
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 292求调剂 +14 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 15/750 2026-03-28 08:45 by WYUMater
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 070300，一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭