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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 关于胰岛素体内样品处理方法
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小小肥猫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-04 08:27:55
液相的话检测精度是不够的，至少是液质，而且普通质谱不行，一般四级杆质谱分质量只能到3000，得用傅里叶质谱了。我们以前做过，提取回收率最高也就能到40%，目前基本上所有胰岛素申报项目的血药胰岛素浓度都是Eli ...

确实，文献关于胰岛素体内样品处理方法找的就挺费劲的，我们想先用液相考察下提取回收率，再上液质。因为以前都是做化药，对于蛋白质的体内样品处理方法不懂啊，所以来请教各位大侠
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11楼2014-12-04 10:31:01
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小小肥猫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by yuecen at 2014-12-04 09:00:26
亲，你真的是很有科研精神啊，180个赞：） 这个是太久远的生物化学的内容啦。胰岛素是小分子蛋白其等电点在5.34-5.45之间，呈弱酸性，PH7.4的磷酸盐缓冲液呈弱碱性，此时不足以使胰岛素的羧基与其提供的正离子成盐 ...

真是解释的太太太太透彻啦！感谢感谢！第一次做蛋白质类的药，一头雾水啊，您真是帮了我大忙啦，3Q！
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12楼2014-12-04 10:48:55
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小小肥猫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-04 08:27:55
液相的话检测精度是不够的，至少是液质，而且普通质谱不行，一般四级杆质谱分质量只能到3000，得用傅里叶质谱了。我们以前做过，提取回收率最高也就能到40%，目前基本上所有胰岛素申报项目的血药胰岛素浓度都是Eli ...

回收率40%是单用液相吗？还是普通的液质？样品处理也是这么繁琐吗？感觉蛋白质药比化药复杂好多啊。。。
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13楼2014-12-04 10:54:47
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小小肥猫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-04 08:39:54
其实单用液相，普通的杂峰和胰岛素峰很难分离，干扰很严重，得进质谱二次分离，不但如此内源性和外源性胰岛素很难区分，血浆里有胰岛素酶，样品也不是太稳定，如果你不是做药动学，你就甭考虑如上所说

就是做药动啊，去跟老板建议下
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14楼2014-12-04 10:55:52
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voyager88

金虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 小小肥猫 at 2014-12-04 10:54:47
回收率40%是单用液相吗？还是普通的液质？样品处理也是这么繁琐吗？感觉蛋白质药比化药复杂好多啊。。。...

我们当时是使用HPLC-MS-MS做的，质谱是傅里叶质谱
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微信公众号：Pharmaguider（药事纵横），主页：www.pharmaguider.cn
15楼2014-12-05 08:50:20
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小小肥猫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 小小肥猫 at 2014-12-04 10:48:55
真是解释的太太太太透彻啦！感谢感谢！第一次做蛋白质类的药，一头雾水啊，您真是帮了我大忙啦，3Q！...

又想了一下，关于ph7.4磷酸盐的作用，还是有点混乱，生理条件下Ph也是7.4左右，那如果胰岛素在这个条件下呈分子状态，那在生理条件下也成分子状态吗？又有点蒙圈。。。
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16楼2014-12-05 11:24:04
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JCH1130

银虫 (小有名气)
能提供一下这个文章的名字吗
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17楼2018-10-11 16:39:30
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