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小小肥猫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-04 08:27:55
液相的话检测精度是不够的,至少是液质,而且普通质谱不行,一般四级杆质谱分质量只能到3000,得用傅里叶质谱了。我们以前做过,提取回收率最高也就能到40%,目前基本上所有胰岛素申报项目的血药胰岛素浓度都是Eli ...

确实,文献关于胰岛素体内样品处理方法找的就挺费劲的,我们想先用液相考察下提取回收率,再上液质。因为以前都是做化药,对于蛋白质的体内样品处理方法不懂啊,所以来请教各位大侠
11楼2014-12-04 10:31:01
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小小肥猫

新虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by yuecen at 2014-12-04 09:00:26
亲,你真的是很有科研精神啊,180个赞:) 这个是太久远的生物化学的内容啦。胰岛素是小分子蛋白其等电点在5.34-5.45之间,呈弱酸性,PH7.4的磷酸盐缓冲液呈弱碱性,此时不足以使胰岛素的羧基与其提供的正离子成盐 ...

真是解释的太太太太透彻啦!感谢感谢!第一次做蛋白质类的药,一头雾水啊,您真是帮了我大忙啦,3Q!
12楼2014-12-04 10:48:55
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小小肥猫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-04 08:27:55
液相的话检测精度是不够的,至少是液质,而且普通质谱不行,一般四级杆质谱分质量只能到3000,得用傅里叶质谱了。我们以前做过,提取回收率最高也就能到40%,目前基本上所有胰岛素申报项目的血药胰岛素浓度都是Eli ...

回收率40%是单用液相吗?还是普通的液质?样品处理也是这么繁琐吗?感觉蛋白质药比化药复杂好多啊。。。
13楼2014-12-04 10:54:47
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小小肥猫

新虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-04 08:39:54
其实单用液相,普通的杂峰和胰岛素峰很难分离,干扰很严重,得进质谱二次分离,不但如此内源性和外源性胰岛素很难区分,血浆里有胰岛素酶,样品也不是太稳定,如果你不是做药动学,你就甭考虑如上所说

就是做药动啊,去跟老板建议下
14楼2014-12-04 10:55:52
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voyager88

金虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 小小肥猫 at 2014-12-04 10:54:47
回收率40%是单用液相吗?还是普通的液质?样品处理也是这么繁琐吗?感觉蛋白质药比化药复杂好多啊。。。...

我们当时是使用HPLC-MS-MS做的,质谱是傅里叶质谱
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
15楼2014-12-05 08:50:20
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小小肥猫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 小小肥猫 at 2014-12-04 10:48:55
真是解释的太太太太透彻啦!感谢感谢!第一次做蛋白质类的药,一头雾水啊,您真是帮了我大忙啦,3Q!...

又想了一下,关于ph7.4磷酸盐的作用,还是有点混乱,生理条件下Ph也是7.4左右,那如果胰岛素在这个条件下呈分子状态,那在生理条件下也成分子状态吗?又有点蒙圈。。。
16楼2014-12-05 11:24:04
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JCH1130

银虫 (小有名气)

能提供一下这个文章的名字吗
17楼2018-10-11 16:39:30
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