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jianqiangli

木虫 (正式写手)

[交流] 色谱峰总有前延,峰形不正

今天做HPLC,样品峰形不正太,起初以为是杂质,用梯度分离,不好使;后来再进一针标准品,发现标准品的峰形依然不好。开始排查原因:
1. 起初流动相加了0.8%冰醋酸, 考虑是否是酸性不够,改为0.8%甲酸,峰形依然没有改变;
2. 考虑是否柱效不行,换了一根柱子;冒险把柱子反冲一次,峰形依然没有改变;
3. 进样阀用甲醇清洗,作用不大;
4. 进针色谱甲醇,用甲醇溶解的样品,看了下吸收度,认为基线基本没有变化;
5. 流动相把甲醇换成乙腈,峰形还是没有变化;
6. 把0.8%冰醋酸流动相,换成纯水峰形还是没有变化;
另外,这根柱子、色谱条件和液相一个月前测这个样品峰形还非常好,最近搬了一次校区再用就不好了,非常奇怪。
明天,把这根柱子换到另一台液相上再试试,再认真清理下进样阀,看看结果吧,实验太揪心!!!
跟大家请教下还有什么方面没有注意到,需要处理下???

色谱峰总有前延,峰形不正
标准品的色谱峰.jpg


色谱峰总有前延,峰形不正-1
色谱甲醇进样色谱峰.jpg
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jianqiangli

木虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by yuecen at 2014-11-27 14:59:26
建议楼主,首先不加色谱柱用两通,加大流速大概4ml/min后5ml/min冲洗仪器,流程是:水,甲醇,乙腈各冲半个小时左右,然后重新配置流动相,注意玻璃仪器的清洁,注意流动相所用到的有机溶剂一定要新开封的,新过滤的 ...

今天用别人的液相,这根柱子峰形很好。回来又换了台检测器发现峰还是不好,应该是仪器污染了,明天用异丙醇冲洗管路

[ 发自小木虫客户端 ]
20楼2014-11-27 18:47:32
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feixiaolin

荣誉版主 (文坛精英)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1. 从老校区灌水过来
2. 调整进样速度?
4楼2014-11-26 21:02:08
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jianqiangli

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by feixiaolin at 2014-11-26 21:02:08
1. 从老校区灌水过来
2. 调整进样速度?

如何调整进样速度?

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-11-27 06:44:34
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feixiaolin

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by jianqiangli at 2014-11-27 06:44:34
如何调整进样速度?
...

柱子稍倾斜一点

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-11-27 07:05:41
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