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hikers86

木虫 (正式写手)

[求助] 镍柱洗脱液用加b-巯基乙醇吗已有1人参与

最近在做包涵体纯化,用8M尿素和2mM b-巯基乙醇溶解,我的平衡液和洗脱液是不是也要加b-巯基乙醇呀?
另外我还想问一下用2M尿素和2% triton x-100洗涤包涵体要洗多久?洗几次?
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lxgnh166

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

做NI层析最好不要加强的还原剂,会还原NI离子,你可以在复性前加还原剂处理2小时,让二硫键断开,包涵体的洗涤,每种缓冲液洗涤一次,可以适当加大洗涤比例,1% triton x-100就可以了。最后再用PB缓冲液洗涤下。
2楼2015-01-30 14:48:56
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