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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » OD值偏高的问题
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hbl215

金虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
疯狂的bamboo: 金币+15, ★★★很有帮助 2014-11-25 04:58:48
疯狂的bamboo: 金币+17, ★★★★★最佳答案, 完全解决了我的问题 我发现最主要的溶血影响了测定 换了血清之后就没问题了 另外我也把封闭时间延长了 非常感谢 2014-11-26 20:07:36
疯狂的bamboo: 回帖置顶 2014-11-26 20:08:08
可能的原因：1.封闭不够完全，一般37度两小时，一小时勉强行（空白OD值高跟显色时间长短，显色试剂灵敏度都有关系）
2.二抗浓度过高，孵育时间过长，都容易出现OD值偏高。你这里的二抗时间温度没问题，稀释度跟所购试剂有关，这个确定一下不是太高。
3.采血确认是没有溶血情况，溶血会引起假阳性。
4.以上三者都没问题了，再看阴性对照跟实验组数据，如果相近的话，那就考虑抗原的问题了，或者獭兔所处环境接触到类似你说所用免疫原的物质。
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11楼2014-11-24 21:37:53
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq：858200882

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
疯狂的bamboo: 金币+8 2014-11-25 08:50:10
封闭那么短肯定是不行的，就算是热封也要四个小时！
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本公司专业从事蛋白纯化，抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq：858200882
12楼2014-11-25 08:30:02
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by hbl215 at 2014-11-24 21:37:53
可能的原因：1.封闭不够完全，一般37度两小时，一小时勉强行（空白OD值高跟显色时间长短，显色试剂灵敏度都有关系）
2.二抗浓度过高，孵育时间过长，都容易出现OD值偏高。你这里的二抗时间温度没问题，稀释度跟所购 ...

溶血真的会造成很大影响吗？因为我有很多血清当初离心提的时候溶血了
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Life needs passion and imagination and most important , action!!!
13楼2014-11-25 08:49:59
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by limichuan at 2014-11-25 08:30:02
封闭那么短肯定是不行的，就算是热封也要四个小时！

嗯 谢谢 我今天把封闭的时间延长下试试
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Life needs passion and imagination and most important , action!!!
14楼2014-11-25 08:50:36
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hbl215

金虫 (文坛精英)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 疯狂的bamboo at 2014-11-25 08:49:59
溶血真的会造成很大影响吗？因为我有很多血清当初离心提的时候溶血了...

溶血很容易引起假阳性，放到这里具体问题具体分析吧，你可以对比下

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15楼2014-11-25 12:30:37
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