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hbl215

金虫 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

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疯狂的bamboo: 金币+15, ★★★很有帮助 2014-11-25 04:58:48
疯狂的bamboo: 金币+17, ★★★★★最佳答案, 完全解决了我的问题我发现最主要的溶血影响了测定换了血清之后就没问题了另外我也把封闭时间延长了非常感谢 2014-11-26 20:07:36
疯狂的bamboo: 回帖置顶 2014-11-26 20:08:08

可能的原因：1.封闭不够完全，一般37度两小时，一小时勉强行（空白OD值高跟显色时间长短，显色试剂灵敏度都有关系）
2.二抗浓度过高，孵育时间过长，都容易出现OD值偏高。你这里的二抗时间温度没问题，稀释度跟所购试剂有关，这个确定一下不是太高。
3.采血确认是没有溶血情况，溶血会引起假阳性。
4.以上三者都没问题了，再看阴性对照跟实验组数据，如果相近的话，那就考虑抗原的问题了，或者獭兔所处环境接触到类似你说所用免疫原的物质。

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11楼2014-11-24 21:37:53

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limichuan

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【答案】应助回帖

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疯狂的bamboo: 金币+8 2014-11-25 08:50:10

封闭那么短肯定是不行的，就算是热封也要四个小时！

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本公司专业从事蛋白纯化，抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq：858200882

12楼2014-11-25 08:30:02

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疯狂的bamboo

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引用回帖:

11楼: Originally posted by hbl215 at 2014-11-24 21:37:53
可能的原因：1.封闭不够完全，一般37度两小时，一小时勉强行（空白OD值高跟显色时间长短，显色试剂灵敏度都有关系）
2.二抗浓度过高，孵育时间过长，都容易出现OD值偏高。你这里的二抗时间温度没问题，稀释度跟所购 ...

溶血真的会造成很大影响吗？因为我有很多血清当初离心提的时候溶血了

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Life needs passion and imagination and most important , action!!!

13楼2014-11-25 08:49:59

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