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蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌转化后平板上一层糊状,是染菌了吗 已有2人参与

我用农杆菌GV3101感受态做电转化,转化后24小时内平板上就长了一层糊状的东西,找不到单菌落,是染菌了吗,我的平板上只有质粒的抗生素,是必须要添加利福平才可以吗?
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蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhongmianhua at 2014-11-20 13:37:24
这种可能性非常大,一方面你可以用你的感受态做一个空白对照,看看是否生长,如果生长,那就是杂菌无疑了;另外一方面你也可以在平板周围挑去一个单菌落培养看看,进行PCR扩增验证。

恩,现已做了对照,正在等待实验结果
5楼2014-11-21 15:26:36
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zhongmianhua

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种可能性非常大,一方面你可以用你的感受态做一个空白对照,看看是否生长,如果生长,那就是杂菌无疑了;另外一方面你也可以在平板周围挑去一个单菌落培养看看,进行PCR扩增验证。
体会生活
2楼2014-11-20 13:37:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电转化效率很高的,你是不是转了过量的质粒,又涂了很多菌液,你用的那个菌株是必须加利福平的

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-11-20 16:35:35
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蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-20 16:35:35
电转化效率很高的,你是不是转了过量的质粒,又涂了很多菌液,你用的那个菌株是必须加利福平的

我加了利福平,庆大,卡娜三抗的平板转化后还是这个样子,转化时质粒加了3微升,大概120ng,涂板时只加了复苏后的200微升菌液,培养过夜后就出现了糊状的一层,有人说可能是死掉的菌体,但是会长一层吗?
4楼2014-11-21 15:26:02
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