| 查看: 2714 | 回复: 17 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
western抗体是怎么识别蛋白一级序列的 已有7人参与
|
||||
| 有的western抗体是识别蛋白一级序列的，请问是怎么特异性识别的？ |
回复此楼» 猜你喜欢
今年春晚有几个节目很不错，点赞！
已经有6人回复
-
基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书
已经有3人回复
-
球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！
已经有15人回复
-
过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链
已经有5人回复
-
情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？
已经有5人回复
-
江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后
已经有3人回复
biotech_zhou
木虫 (著名写手)
待人以诚：专业/专注/专心
- 应助: 373 (硕士)
- 金币: 2037.6
- 散金: 206
- 红花: 6
- 帖子: 1441
- 在线: 317.6小时
- 虫号: 3078402
- 注册: 2014-03-21
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
14楼2014-11-21 16:27:24
xiaoyugutou 
捐助贵宾 (小有名气)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 162.7
- 散金: 290
- 红花: 1
- 帖子: 215
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 1716151
- 注册: 2012-03-25
- 专业: 细胞周期与调控
2楼2014-11-19 06:07:14
3楼2014-11-19 10:06:51
youlinglyw
荣誉版主 (著名写手)
一匡天下
-
专家经验: +37 - BioEPI: 5
- 应助: 136 (高中生)
- 贵宾: 0.077
- 金币: 8052.9
- 散金: 8858
- 红花: 208
- 沙发: 2
- 帖子: 1511
- 在线: 263.8小时
- 虫号: 787036
- 注册: 2009-06-04
- 性别: GG
- 专业: 认知科学
- 管辖: 生物科学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
muyuchc: 金币+10 2014-11-20 19:17:01
感谢参与，应助指数 +1
muyuchc: 金币+10 2014-11-20 19:17:01
|
大多数情况下，抗体的制备是通过一级序列去制备的。 简单的回顾下抗体的制备方法 1构建表达载体 2原核表达 3纯化蛋白 4免疫动物制备抗体 发现没，经过1,2,3步骤，这是原核表达步骤，原核表达的蛋白 1没有活性， 2多肽为主。 因为原核表达的蛋白 1缺乏真核表达所需要的酶，所以无法正确折叠成蛋白 2缺乏真核表达所需要的内环境，细胞器等 3原核表达以包涵体表达为主，所以，经过那么强烈的ph变化和尿素处理最后纯化出来的蛋白，有活性才怪，基本上就是条肽链 那么，以上问题解决了，答案就很明显了，你用的一级序列去制备抗体，那么抗体能够识别的， 自然是一级序列了 然后问题来了，这种情况下，事实上，抗体是不特异的。所以，极少见那些可以用自己制备抗体做出非常单一漂亮的wb图片的 所以，如何解决？单克隆抗体嘿嘿，牛一点咋办，直接从生物里提取活的抗体，那样最有用，生化危机啦，猿星崛起啦，都是这么干的。 |
4楼2014-11-19 10:42:55