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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 胞内钙离子浓度检测
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)

[求助] 胞内钙离子浓度检测 已有1人参与

我最近做了几次利用激光共聚焦对胞内钙离子浓度检测的实验，对检测出的数据做了折线图，但是由于不同批做的，导致相同浓度药物的纵坐标相差很大，想问问这和检测时的参数设置不同有没有关系，另外还有请大神指点一下应该怎样对这个实验数据进行分析~~~
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1楼 2014-11-17 13:26:03
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 轩韵阁0 at 2014-11-17 20:25:45
谢谢，那再问一下，你们测胞内钙的时候参数是怎么调的啊？因为我们这还只是初期实验，技术不太成熟，所以想请教一下...

我都是测溶液的荧光，没测过细胞内的荧光。比如我测溶液中蛋白质色氨酸的荧光，我要用Abs295=0.1的色氨酸溶液（F1）和溶剂做对照(F0),相对值重复性很好，细胞的变异应该会更大些。我看过别人用共聚焦显微镜做FCCS，用固定浓度的荧光染料（你用的Fura吧？）滴在载玻片上（她的细胞溶液也是滴在载玻片上）做对照F1,而她的Fo则是在检测的细胞内选无荧光区测得的荧光值。 如果你指荧光显微镜的参数，你可以参考相关文献啊，细胞内钙离子浓度检测非常多，重要的参数会很容易找。
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轩韵阁0
慎思明辨博学笃行
4楼2014-11-17 20:47:37
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
轩韵阁0: 金币+5, ★有帮助 2015-03-09 16:54:59
荧光值本来就受很多因素影响，用相对值会好些。比如把每次检测应该出现的最高值F1设为100%，如果最低值F0应该接近零就设为零，中间值按(F-F0)/(F1-F0)*100%计算。
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轩韵阁0
慎思明辨博学笃行
2楼2014-11-17 19:17:56
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-17 19:17:56
荧光值本来就受很多因素影响，用相对值会好些。比如把每次检测应该出现的最高值F1设为100%，如果最低值F0应该接近零就设为零，中间值按(F-F0)/(F1-F0)*100%计算。

谢谢，那再问一下，你们测胞内钙的时候参数是怎么调的啊？因为我们这还只是初期实验，技术不太成熟，所以想请教一下
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3楼2014-11-17 20:25:45
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-17 20:47:37
我都是测溶液的荧光，没测过细胞内的荧光。比如我测溶液中蛋白质色氨酸的荧光，我要用Abs295=0.1的色氨酸溶液（F1）和溶剂做对照(F0),相对值重复性很好，细胞的变异应该会更大些。我看过别人用共聚焦显微镜做FCCS， ...

我用的是共聚焦专用的培养皿培养的细胞，指示剂用的是flou-4 AM ，我以为你测的也是细胞内的钙离子浓度呢，我再找找文献看看，谢谢啦~~~
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5楼2014-11-18 14:11:56
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