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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)

[求助] 胞内钙离子浓度检测 已有1人参与

我最近做了几次利用激光共聚焦对胞内钙离子浓度检测的实验,对检测出的数据做了折线图,但是由于不同批做的,导致相同浓度药物的纵坐标相差很大,想问问这和检测时的参数设置不同有没有关系,另外还有请大神指点一下应该怎样对这个实验数据进行分析~~~
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
轩韵阁0: 金币+5, 有帮助 2015-03-09 16:54:59
荧光值本来就受很多因素影响,用相对值会好些。比如把每次检测应该出现的最高值F1设为100%,如果最低值F0应该接近零就设为零,中间值按(F-F0)/(F1-F0)*100%计算。

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慎思明辨博学笃行
2楼2014-11-17 19:17:56
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 轩韵阁0 at 2014-11-17 20:25:45
谢谢,那再问一下,你们测胞内钙的时候参数是怎么调的啊?因为我们这还只是初期实验,技术不太成熟,所以想请教一下...

我都是测溶液的荧光,没测过细胞内的荧光。比如我测溶液中蛋白质色氨酸的荧光,我要用Abs295=0.1的色氨酸溶液(F1)和溶剂做对照(F0),相对值重复性很好,细胞的变异应该会更大些。我看过别人用共聚焦显微镜做FCCS,用固定浓度的荧光染料(你用的Fura吧?)滴在载玻片上(她的细胞溶液也是滴在载玻片上)做对照F1,而她的Fo则是在检测的细胞内选无荧光区测得的荧光值。 如果你指荧光显微镜的参数,你可以参考相关文献啊,细胞内钙离子浓度检测非常多,重要的参数会很容易找。

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慎思明辨博学笃行
4楼2014-11-17 20:47:37
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-17 20:47:37
我都是测溶液的荧光,没测过细胞内的荧光。比如我测溶液中蛋白质色氨酸的荧光,我要用Abs295=0.1的色氨酸溶液(F1)和溶剂做对照(F0),相对值重复性很好,细胞的变异应该会更大些。我看过别人用共聚焦显微镜做FCCS, ...

我用的是共聚焦专用的培养皿培养的细胞,指示剂用的是flou-4 AM ,我以为你测的也是细胞内的钙离子浓度呢,我再找找文献看看,谢谢啦~~~
5楼2014-11-18 14:11:56
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-17 19:17:56
荧光值本来就受很多因素影响,用相对值会好些。比如把每次检测应该出现的最高值F1设为100%,如果最低值F0应该接近零就设为零,中间值按(F-F0)/(F1-F0)*100%计算。

谢谢,那再问一下,你们测胞内钙的时候参数是怎么调的啊?因为我们这还只是初期实验,技术不太成熟,所以想请教一下
3楼2014-11-17 20:25:45
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 轩韵阁0 at 2014-11-18 14:11:56
我用的是共聚焦专用的培养皿培养的细胞,指示剂用的是flou-4 AM ,我以为你测的也是细胞内的钙离子浓度呢,我再找找文献看看,谢谢啦~~~...

不客气,也没帮上什么
慎思明辨博学笃行
6楼2014-11-18 14:48:26
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-18 14:48:26
不客气,也没帮上什么...

不不,也帮忙了,有问题还是可以讨论讨论滴
7楼2014-11-18 20:23:39
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 轩韵阁0 at 2014-11-18 20:23:39
不不,也帮忙了,有问题还是可以讨论讨论滴...

等我测细胞内钙离子浓度的时候请教你
慎思明辨博学笃行
8楼2014-11-18 21:01:15
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轩韵阁0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-18 21:01:15
等我测细胞内钙离子浓度的时候请教你...

我们可以互相学习,一起讨论讨论
9楼2014-11-19 13:19:54
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syz231

新虫 (初入文坛)

楼主好!我现在也在做胞内钙离子浓度的检测,不过用的是荧光显微镜,我有些问题想请教下,积累些经验可以么?
10楼2015-01-28 19:34:46
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