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Beatrice伦伦

新虫 (初入文坛)

[求助] EDC交联 已有1人参与

请问有人熟悉EDC交联吗或者做过这种实验?我想用EDC把一种蛋白大分子与另一种小蛋白的弱相互作用稳定住,请问可行吗?会影响它们本来的相互作用吗?EDC反应所需多长时间呢?谢谢。

[ Last edited by 红舟流星 on 2014-11-15 at 21:36 ]
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pengyingjing

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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先将大蛋白EDC活化,注意比例,然后加入小蛋白。但是不可避免的,大蛋白之间会有相互作用吧
2楼2014-11-13 16:18:30
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Beatrice伦伦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pengyingjing at 2014-11-13 16:18:30
先将大蛋白EDC活化,注意比例,然后加入小蛋白。但是不可避免的,大蛋白之间会有相互作用吧

谢谢。我做了几个平行实验
3楼2014-11-16 15:48:07
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Beatrice伦伦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pengyingjing at 2014-11-13 16:18:30
先将大蛋白EDC活化,注意比例,然后加入小蛋白。但是不可避免的,大蛋白之间会有相互作用吧

您好,请问EDC交联产物可以用SDS-PAGE电泳检测吗?交联产物会分开吗?
4楼2014-11-17 12:53:39
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Beatrice伦伦

新虫 (初入文坛)

SDS-PAGE电泳检测发现大蛋白+小蛋白+EDC+NHS一起孵育时有部分交联,然而用EDC+NHS处理大蛋白15min再加小蛋白没有交联,这是为啥呢
5楼2014-11-17 19:09:37
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Beatrice伦伦

新虫 (初入文坛)

求助大神们,有人做过EDC交联反应吗?你们交联的效率高吗?交联效率与反应时间,EDC浓度有没有关系?在线等。
6楼2014-11-17 21:40:49
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