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Stefanie旭

铁虫 (正式写手)

[求助] 一个有关用液相色谱分离纯化的问题 已有6人参与

用液相跑某一个样品,发现杂质峰比较多,欲将主峰物质进一步分离纯化,收集相应峰馏分。用普通的分析检测型的HPLC可以做到吗?还是用制备型色谱?我们导师的意见是前者,只要收集到一点点就可以,然后可以做定性分析...可我查文献里说都是用制备型色谱分离...这让我感到很恼火,希望懂色谱的高手指导一下,多谢
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zl781202

金虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by Stefanie旭 at 2014-11-10 14:59:51
您能告诉我具体的收集过程吗?我对这种分离方法不了解,谢谢了...

你是指怎么收集的?这个很简单,只要你需要的成分峰在液相色谱上能够分离,就能够收集到纯度较高的组分。
如果你需要的组分峰前后都很干净,找个几毫升的样品瓶,在它刚出峰就可以在废液排出口进行收集了,出峰完稍微过个几秒钟就停止收集;如果组分峰前或后有个较近的杂质峰,最好估算下检测器出口到废液排放口那段管路的大概体积,根据流速计算组分从检测器出口到废液排放口所需的时间,收集时注意减去和加上那段管路的时间就行了,因为组分在检测器刚出峰时,在废液出口的还是组分前面的东西,还没流到出口。
多收集几次,将收集到的减压蒸馏、浓缩再稍微稀释进液相看纯度是否够,够的保留,不够的再纯化,直到纯度OK

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精益求精
19楼2014-11-11 10:53:18
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Stefanie旭: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-11-10 09:25:54
分析型的的确也可以,但是要提高进样量(保证分离度的前提),同时要重复多次才可以达到制备的效果,文献只是参考,要根据实际应用灵活把握;制备的话效率高,可能一次分离就足够你做定性分析了。
归零
2楼2014-11-09 10:52:49
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dongbangwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要纯化,要有足够的供试品,当然最好是制备液相,进样量大;如果是普通分析型液相,也可以,但是一般浓度很小,进样量最多也就是150ul(还是自动进样器)手动进样也就是20ul的定量环,所以还不知道要收集多少次呢
浪费时间
弟子入则孝,出则弟,谨而信,泛爱众,而亲仁,行有余力,则以学文。
3楼2014-11-09 14:21:32
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Stefanie旭

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2014-11-09 10:52:49
分析型的的确也可以,但是要提高进样量(保证分离度的前提),同时要重复多次才可以达到制备的效果,文献只是参考,要根据实际应用灵活把握;制备的话效率高,可能一次分离就足够你做定性分析了。

嗯,对这方面实在了解不多。能具体说一下分析型色谱怎么才能比较准确的收集到对应峰的样品吗?
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4楼2014-11-09 17:51:17
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