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Stefanie旭

铁虫 (正式写手)

[求助] 一个有关用液相色谱分离纯化的问题 已有6人参与

用液相跑某一个样品,发现杂质峰比较多,欲将主峰物质进一步分离纯化,收集相应峰馏分。用普通的分析检测型的HPLC可以做到吗?还是用制备型色谱?我们导师的意见是前者,只要收集到一点点就可以,然后可以做定性分析...可我查文献里说都是用制备型色谱分离...这让我感到很恼火,希望懂色谱的高手指导一下,多谢
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zl781202

金虫 (正式写手)

用分析液相做制备,个人建议以下几点
1.选手动分析液相不选自动进样分析液相,原因:自动进样的分析液相最大进样量就100-150ul,要收集到足够量的物质,若是主成分还好,若是杂质成分的话,没个几百针是不够的,同时,还必须提高进样浓度,浓度太高又溶液堵在进样针中析出,堵塞进样针。如果是手动的分析液相,买个500ul-1ml的定量环(几百块钱),再买支1ml的手动进样针(几十块钱),就可以增大你的进样量,再适当提高进样浓度,即使是做杂质收集,几十针就可以收集到50mg以上。
2.制备柱要选好,个人建议选直径10mm的制备柱,通常流速就是5ml/min,这样的流速大多分析液相都能承受,再高可能就会漏液了

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精益求精
15楼2014-11-10 11:27:39
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Stefanie旭: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-11-10 09:25:54
分析型的的确也可以,但是要提高进样量(保证分离度的前提),同时要重复多次才可以达到制备的效果,文献只是参考,要根据实际应用灵活把握;制备的话效率高,可能一次分离就足够你做定性分析了。
归零
2楼2014-11-09 10:52:49
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dongbangwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要纯化,要有足够的供试品,当然最好是制备液相,进样量大;如果是普通分析型液相,也可以,但是一般浓度很小,进样量最多也就是150ul(还是自动进样器)手动进样也就是20ul的定量环,所以还不知道要收集多少次呢
浪费时间
弟子入则孝,出则弟,谨而信,泛爱众,而亲仁,行有余力,则以学文。
3楼2014-11-09 14:21:32
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Stefanie旭

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2014-11-09 10:52:49
分析型的的确也可以,但是要提高进样量(保证分离度的前提),同时要重复多次才可以达到制备的效果,文献只是参考,要根据实际应用灵活把握;制备的话效率高,可能一次分离就足够你做定性分析了。

嗯,对这方面实在了解不多。能具体说一下分析型色谱怎么才能比较准确的收集到对应峰的样品吗?
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4楼2014-11-09 17:51:17
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