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kakabada123

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA一直提不好,都想退学了,跪求各位帮助 已有2人参与

传统trizol法提取RNA连续一个月了 总是提不好 有的时候是浓度超级低 就跟没有一样  有的时候是电泳图拖尾严重 有的时候是浓度挺好的,OD260/280也好,但是电泳图没有任何东西。
于是买了OMEGA试剂盒
试剂盒一到 昨晚就熬夜提
左一条带是传统法,左二条带是试剂盒
没有跑marker
帮我看看,
第一,按哪个方法提取合格,还是都不合格?
第二,这样的结果能不能往下做,想做Q-PCR
谢谢了!

RNA一直提不好,都想退学了,跪求各位帮助
电泳图.JPG
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kakabada123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-11-11 14:06:53
提RNA最重要的是去除RNA酶,如果条件好的话,所有的枪头,EP管等都用进口的,而且确认没开封的。如果没钱的话,全部用DEPC水处理高压,然后尽可能短时间内使用,必须带帽子、口罩、手套,其他试剂像异丙醇之类的最好 ...

异丙醇、酒精什么的大瓶装的试剂是不是应该分装好?非常感谢
19楼2014-11-11 22:38:30
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li245824369

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-07 21:47:43
你这提的是什么里的RNA啊?
2楼2014-11-07 19:44:00
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fuchange918

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-07 21:47:50
第一道,我貌似只看到了一条带,和第二道的相比较的话,应该是5s带,所以第一道的提取方法肯定不可以。
第二道,可以看出18s是28s亮度的2倍多,应该是降解严重(特殊物种除外),做Q-PCR需慎重。
3楼2014-11-07 20:31:54
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Neo2000

木虫 (著名写手)

连胶都没跑好,看来楼主有很多地方没做到位,留下QQ聊

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-11-07 22:34:38
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