24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 423  |  回复: 2

youzhi-l

新虫 (初入文坛)

[求助] 烟草基因组PCR 已有1人参与

做转基因烟草鉴定工作,最近新设计了引物,生工合成引物回来的理论退火温度为50度,用TAKARA的酶一直都P不出来条带,使用全世金的supermix引物做PCR之后到60°的退火温度时才能出来比较单一的条带,条带大小在目的基因大小处,跟导师商量之后说退火温度太高了不合适,但是降低温度的话会有很多的非特异条带,所以想问下哪位大神可以提供一些建议?图中使用梯度PCR,温度从48度到60度

烟草基因组PCR
捕获.PNG
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你这个也就是引物设计问题,自己设计一条不就好了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-11-05 23:22:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

free_zi

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

烟草基因的扩增有难度,建议选择pfx高保真酶,添加DMSO,可以增加特异性。可以尝试一下。
3楼2015-05-21 13:35:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 youzhi-l 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269求调剂 +8 啊啊我我 2026-04-07 8/400 2026-04-09 19:10 by 探123
[考研] 调剂 化学 307 +11 73372112 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:52 by vgtyfty
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +14 招61排名62 2026-04-07 17/850 2026-04-09 18:25 by hy861222
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +11 wakeluofu 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:03 by lijunpoly
[考研] 316求调剂 +3 想读研究生( ?∵ 2026-04-07 3/150 2026-04-09 17:31 by wp06
[材料工程] 材料调剂推荐 +3 蛋糕x2 2026-04-07 3/150 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +18 梁富贵险中求 2026-04-04 20/1000 2026-04-09 11:18 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 一志愿北京2,材料与化工308求调剂 +17 熊二想上岸 2026-04-04 18/900 2026-04-09 09:13 by leyan1127
[考研] 270求调剂 +3 031127 2026-04-06 4/200 2026-04-08 21:00 by 逆水乘风
[考研] 264求调剂 +11 麦小叮当 2026-04-07 11/550 2026-04-08 16:05 by 一只好果子?
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 334分机械专硕求调剂 +3 蛋花紫菜汤 2026-04-03 3/150 2026-04-07 14:49 by 逍遥cocoa
[考研] 22408 331分求调剂 +4 y__1 2026-04-06 4/200 2026-04-06 17:26 by 土木硕士招生
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:24 by 544594351
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
信息提示
请填处理意见