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烟草基因组PCR 已有1人参与
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做转基因烟草鉴定工作,最近新设计了引物,生工合成引物回来的理论退火温度为50度,用TAKARA的酶一直都P不出来条带,使用全世金的supermix引物做PCR之后到60°的退火温度时才能出来比较单一的条带,条带大小在目的基因大小处,跟导师商量之后说退火温度太高了不合适,但是降低温度的话会有很多的非特异条带,所以想问下哪位大神可以提供一些建议?图中使用梯度PCR,温度从48度到60度 捕获.PNG |
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