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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 溶出曲线HPLC取样量问题
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summers1985

木虫 (著名写手)

[交流] 溶出曲线HPLC取样量问题 已有6人参与

有个疑问 很多资料上看做溶出曲线都是写“取样10mL,过滤，取续滤液5mL，再加XXX定容至刻度进样”  为什么不直接取1-1.5mL,离心取上清液进样呢？ 只要连续取样不超过10%的介质不就行了么。
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存在X总是开玩笑。
1楼 2014-10-31 10:26:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

喵喵与咩咩

铁杆木虫 (著名写手)

要把生活过成诗和远方
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
summers1985(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-11-08 15:48:14
summers1985: 金币+1 2014-11-08 16:18:03
过滤的时候要考虑到滤膜吸附作用，取样太少，可能有效成分会被滤膜吸附掉很多，导致实际测定的含量偏低，通常，滤膜要先饱和，所以要求弃去初滤液1ml左右，取续滤液进行下一步操作。
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生命不息，奋斗不止
4楼2014-11-07 15:33:04
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zhychen2008

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果取出的样品中含有尚未溶出的样品，在离心过程中溶出，就会导致不准确，而取10ml离心，就可避免由于再溶出导致的浓度不准确，对于滤膜吸附的问题，需要经过验证，也就是需要去除多少初滤液的问题
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Yesterday.Today,Tomorrow！
6楼2014-11-08 15:52:52
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zhychen2008

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by summers1985 at 2014-11-08 20:31:14
方案：1.取对照品，过滤和不过滤作对比；
2.取样品离心和过滤膜做对比

这样？...

最好都做一下，才能全面验证
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Yesterday.Today,Tomorrow！
14楼2014-11-08 22:30:19
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普通回帖

zhou99123

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
summers1985(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-11-08 15:47:45
summers1985: 金币+1 2014-11-08 16:17:44
你能保证溶液的均匀性？
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药物制剂
2楼2014-11-07 09:16:09
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youxingyi

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
summers1985: 金币+1 2014-11-08 16:17:54
那么少，误差也不小吧？照你这么说，配制某某某浓度的溶液，用十万分之一的天平直接称量0.1-3mg，加入1000ml容量瓶中定容不就完了嘛......
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3楼2014-11-07 14:50:11
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millan23

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
取10ml好取1ml我认为都是考虑操作的方便性。毕竟样品量大的情况下去离心会比较麻烦
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以头撞墙，墙破而头不破
5楼2014-11-07 16:54:00
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summers1985

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhou99123 at 2014-11-07 09:16:09
你能保证溶液的均匀性？

溶液的均匀性看取样的位置吧？对结果影响《0.2%
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存在X总是开玩笑。
7楼2014-11-08 17:05:30
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summers1985

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by youxingyi at 2014-11-07 14:50:11
那么少，误差也不小吧？照你这么说，配制某某某浓度的溶液，用十万分之一的天平直接称量0.1-3mg，加入1000ml容量瓶中定容不就完了嘛......

还真有这么干的。。
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存在X总是开玩笑。
8楼2014-11-08 17:05:43
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summers1985

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 喵喵与咩咩 at 2014-11-07 15:33:04
过滤的时候要考虑到滤膜吸附作用，取样太少，可能有效成分会被滤膜吸附掉很多，导致实际测定的含量偏低，通常，滤膜要先饱和，所以要求弃去初滤液1ml左右，取续滤液进行下一步操作。

采用直接离心呢？ 因为 5、10、15时间点靠的太近，而且样品量会非常大，谢老师的文献上说 取样到处理完样品要30s内，时间太紧。
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存在X总是开玩笑。
9楼2014-11-08 17:06:44
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summers1985

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by millan23 at 2014-11-07 16:54:00
取10ml好取1ml我认为都是考虑操作的方便性。毕竟样品量大的情况下去离心会比较麻烦

是的，样品量大。
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存在X总是开玩笑。
10楼2014-11-08 17:07:05
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