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原始深林

银虫 (初入文坛)

[求助] 结合转移 已有2人参与

有没有哪位大神做结合转移的呀,我做大肠杆菌和双歧杆菌的结合转移已经两个月了,一直无法成功呀,求大神指点呀,不胜感激!
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实验狗伤不起,改行好不好
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原始深林

银虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by bainaling at 2014-10-29 11:18:54
是两亲接合吗?我觉得最好也是先看文献中是否有关于双歧的突变库的构建,用的是什么质粒,然后根据文献中的操作再摸索条件

是两亲结合,用的是pUZ8002/pHL931的质粒,我是直接根据文献条件做的
实验狗伤不起,改行好不好
7楼2014-10-29 15:34:21
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做过结合但不是双歧杆菌,你怎么做的不成功?如果可以通过结合应该很容易。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-10-28 18:28:09
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你这个菌以前没有做过接合转移,也就是说没有成熟的接合转移系统,就应该先摸索条件,包括热激活温度,预萌发时间,孢子浓度,大肠杆菌浓度,盖药时间,盖药终浓度等等。
3楼2014-10-28 21:12:36
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原始深林

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cuihao102 at 2014-10-28 21:12:36
如果你这个菌以前没有做过接合转移,也就是说没有成熟的接合转移系统,就应该先摸索条件,包括热激活温度,预萌发时间,孢子浓度,大肠杆菌浓度,盖药时间,盖药终浓度等等。

我是根据一篇外文文献做的,直接将大肠和双歧在平板上培养厌氧12h,大肠和双歧接触的话,质粒就可以转移到双歧当中了,大肠是构建好的工程菌,但是一直都没成功
实验狗伤不起,改行好不好
4楼2014-10-29 09:48:41
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