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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA跑胶
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1109841141

铜虫 (初入文坛)

[求助] DNA跑胶 已有8人参与

今天用了一种新的引物，也改了一下PCR的条件，出现了以下问题，目的条带是100多，用的是DL2000，条带出来了就是太粗了，不知道是哪里出了问题，做的是鼠尾鉴定，抽的小鼠尾巴的DNA，然后PCR的，用的是goldview，有师兄说是和染料还有跑 的时间有问题，具体也不是特别明确，求指点

DNA跑胶
DNA跑胶.jpg
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1楼 2014-10-26 23:03:18
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12101008

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
也有可能特异性不是很好
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2楼2014-10-26 23:23:00
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cnzpli

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1109841141(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-27 08:38:35
条带粗是上样量太大 pcr我一般3-5微升 条带很漂亮

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3楼2014-10-26 23:34:24
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cnzpli

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
1109841141(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-27 08:38:46
100bp的条带用小一点的marker就行 markerΙ或者50bp都行

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4楼2014-10-26 23:36:20
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我是瑞瑞

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1109841141(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:56:46
胶用1%，产物加少一点几微升就可以了，marker一般3微升。
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5楼2014-10-27 10:25:49
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小T在努力！

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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1109841141(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:56:54
是上样量太多了吧！而且你100bp的用ds2000，范围太大了点吧！引物二聚体也有可能这么大啊。建议换个maker试试。

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加油哦！
6楼2014-10-27 10:39:02
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对木简歌

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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也有可能是跑的时间太久了，带模糊了，可以跑一段时间观察一下，接着跑
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沧海月明，且听风吟
7楼2014-10-27 10:56:21
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愤怒的家雀

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1109841141(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:57:11
减少上样量会好一点，注意一下跑胶时间，染料基本没问题！
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8楼2014-10-27 12:14:33
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chuanqi0711

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1109841141(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:57:27
胶的浓度高一些，提高到2%，这样小的条带能看清楚些
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9楼2014-10-28 08:44:33
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kuileiwawa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 对木简歌 at 2014-10-27 10:56:21
也有可能是跑的时间太久了，带模糊了，可以跑一段时间观察一下，接着跑

你好！我刚接触分子生物，好多不懂，想认识几个这方向的朋友，可以认识一下么？
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把小木虫发展壮大！！！
10楼2014-10-28 20:39:38
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