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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提真菌RNA有降解，是不是菌丝放置过久导致的
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zzx1123

铁虫 (初入文坛)

[求助] 提真菌RNA有降解，是不是菌丝放置过久导致的 已有2人参与

我将真菌菌丝刮下来放置于干净的离心管约2个小时后才用液氮冷冻，请问这2个小时内真菌RNA会发生严重降解吗，因为跑电泳时RNA有严重降解，不知道是不是这个原因，求各位大神帮助
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don'tgiveup
1楼 2014-10-22 15:16:39
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cuihao102

木虫 (小有名气)

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★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-22 20:48:38
zzx1123: 金币+2, ★有帮助 2014-10-23 21:03:12
菌丝放置时间长是会有影响的，但是2小时影响应该不会那么大，因为即使在培养基中正在生长的菌体中RNA也会发生降解。严重降解可能还是和你提的过程中哪一步骤没注意到有关系，RNA太脆弱了，提的过程中一定要快、净，跑电泳的设备也是要去RNA酶的。
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2楼2014-10-22 16:37:34
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-22 20:46:51
zzx1123: 金币+2 2014-10-23 21:03:45
同楼上，菌丝体放2小时一般不会引起RNA严重降解，应该是提取或电泳检测过程中的步骤有问题。RNA实验对操作和环境要求较高，一定要保证所用的容器、水均经过去RNase处理，桌面和手套最好喷过RNaseOUT之类的表面清洁剂，等等等等，一大堆注意事项...不赘述了。
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3楼2014-10-22 17:45:31
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zzx1123

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cuihao102 at 2014-10-22 16:37:34
菌丝放置时间长是会有影响的，但是2小时影响应该不会那么大，因为即使在培养基中正在生长的菌体中RNA也会发生降解。严重降解可能还是和你提的过程中哪一步骤没注意到有关系，RNA太脆弱了，提的过程中一定要快、净， ...

谢谢指教

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don'tgiveup
4楼2014-10-24 20:14:54
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