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helen112233

木虫 (正式写手)

[求助] C18色谱柱对DNA死吸附?

如题,一直用的是安捷伦的C18色谱柱分析DNA,在连续使用一段时间后出现色谱柱对DNA不保留的情况,并且伴有非常严重的柱内扩散。
因此采用,乙腈—异丙醇—乙腈对色谱柱进行再生。
再生后,色谱柱进样样品峰形较比以前好,但是用色谱柱分析DNA却不出峰了。
之前乙腈:水,梯度洗脱,乙腈从5%-15% ,10min内出峰。
但是现在,水,梯度洗脱,乙腈从5%-40% ,20min内无DNA色谱峰出现?
采用荧光标记的DNA进行了确认,发现DNA被色谱柱死吸附了,根本没有冲出来。(实验室还有一根色谱柱,不知道是什么时候的,试了一下也是这种情况?!)
不知道是不是C18色谱柱不适用于DNA的分析,或是什么其他原因导致的,还请大神解答!在此感激不尽!!
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