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helen112233

木虫 (正式写手)

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[求助] C18色谱柱对DNA死吸附？

如题，一直用的是安捷伦的C18色谱柱分析DNA，在连续使用一段时间后出现色谱柱对DNA不保留的情况，并且伴有非常严重的柱内扩散。
因此采用，乙腈—异丙醇—乙腈对色谱柱进行再生。
再生后，色谱柱进样样品峰形较比以前好，但是用色谱柱分析DNA却不出峰了。
之前乙腈：水，梯度洗脱，乙腈从5%-15% ,10min内出峰。
但是现在，水，梯度洗脱，乙腈从5%-40% ,20min内无DNA色谱峰出现？
采用荧光标记的DNA进行了确认，发现DNA被色谱柱死吸附了，根本没有冲出来。(实验室还有一根色谱柱，不知道是什么时候的，试了一下也是这种情况？！)
不知道是不是C18色谱柱不适用于DNA的分析，或是什么其他原因导致的，还请大神解答！在此感激不尽！！

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1楼 2014-10-21 20:06:57

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