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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助-HPLC峰面积减小原因
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lbksipi

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助-HPLC峰面积减小原因

一个多肽药物，连续自动进样，发现第二次进样的峰面积总是小于第一次，大约10% ；以为是由于温度影响药物稳定性，但是第一次进样后放冰箱接着第二次进样，仍然如此；但是第三次进样后与第二次相差约5%，非常困惑，盼高手帮忙分析分析。
另：流动相为磷酸二氢钠，含碱性pH调节剂0.01mol/l，磷酸调节pH2.5，检测波长210nm,40度柱温。
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1楼 2008-05-04 09:42:38
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jrhcgq

木虫 (正式写手)

小药工
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):好同志！！继续！
帮你顶一下，等高手来发飚，顺便学习下
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http://pic.emuch.net/20060321/77e231c8fc1b55216322d9a05b2f512d.jpg
2楼2008-05-04 09:45:15
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liposome

木虫 (小有名气)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):我认为柱子的原因较小，要是的话，应该峰面积从小到大！柱子饱和后就对药物无吸附了，！还得谢谢应助！希望以后多发表个人观点，我们大家共同讨论、学习！
是否柱子对药物产生保留作用，换个柱或采用预柱试试
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3楼2008-05-04 13:07:08
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lyhongfree

银虫 (小有名气)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢应助！
如果操作无问题,就是此药稳定性问题.
1.可能是其溶液不稳定,可变换一下ph值.
2.你所做的试验不能证明温度对其溶液稳定性没有影响,只能证明温度对其有一定的影响,温度低可减缓其降解速度.
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4楼2008-05-04 16:32:35
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blackgound

金虫 (小有名气)
会不会是过载了，建议把样品稀释了再试试
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5楼2008-05-05 15:39:25
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wwhong7217

金虫 (小有名气)
还可能是检测波长有问题
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6楼2008-05-05 16:13:54
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19760815

金虫 (小有名气)
估计是稳定性的问题
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◎劳动者是最美的人http://pic.emuch.net/20070412/e8648a6c247a2574aa5230d25a60b0f6.jpg
7楼2008-05-05 22:25:03
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lcxbzm

金虫 (小有名气)
★
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢应助！！！
我做液相分析时,经常出一些无缘无故的问题.我建议:
1.重新配样.样品即使进完样,马上放入冰箱,也不能避免它变质.多重复几次,试试.
2.冲柱子.好好用甲醇-水冲冲柱子,之后用甲醇冲,确保柱子的安全.等柱子正常后,再试试看.
    以上仅是个人观点,供参考!
   
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欢迎大家和我交流！
8楼2008-05-06 10:09:35
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jhx99

★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！
我认为这种情况是多种因素影响：
1、色谱柱的问题  你的样品或者流动相影响了你的色谱柱的柱效，检验方法就是用其他样品（已知、易做）进行检测柱效
2、流动相的问题  你的流动相是否影响你的样品，使其分解或改变其他成分
3、样品制备   制备过程中用的溶剂影响了样品，使其在一段时间内反应或分解
4、检测器的原因  它的寿命已接近“死亡”
。。。。。。。。。
但是我认为最大的原因还是色谱柱的问题，因为在做之前应该做了方法学考察，考察了稳定性、重复性、系统适应性考察等等，我想先换色谱柱进行比较、再者查标准或文献进行参考
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9楼2008-05-06 11:57:15
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