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lbksipi

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助-HPLC峰面积减小原因

一个多肽药物,连续自动进样,发现第二次进样的峰面积总是小于第一次,大约10% ;以为是由于温度影响药物稳定性,但是第一次进样后放冰箱接着第二次进样,仍然如此;但是第三次进样后与第二次相差约5%,非常困惑,盼高手帮忙分析分析。
另:流动相为磷酸二氢钠,含碱性pH调节剂0.01mol/l,磷酸调节pH2.5,检测波长210nm,40度柱温。
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jhx99


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
我认为这种情况是多种因素影响:
1、色谱柱的问题  你的样品或者流动相影响了你的色谱柱的柱效,检验方法就是用其他样品(已知、易做)进行检测柱效
2、流动相的问题  你的流动相是否影响你的样品,使其分解或改变其他成分
3、样品制备   制备过程中用的溶剂影响了样品,使其在一段时间内反应或分解
4、检测器的原因  它的寿命已接近“死亡”
。。。。。。。。。
但是我认为最大的原因还是色谱柱的问题,因为在做之前应该做了方法学考察,考察了稳定性、重复性、系统适应性考察等等,我想先换色谱柱进行比较、再者查标准或文献进行参考
9楼2008-05-06 11:57:15
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