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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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humants

金虫 (正式写手)

[交流] [求助] PCR试剂加入顺序

弱弱的问题,本人打算做PCR好像听人说要注意试剂加入的顺序,在网上搜了半天只有标准反应体系,并没有加入顺序阿?
用不用使用751测一下模板的浓度?
有哪位虫友能帮帮我?谢谢...
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jerome711

银虫 (小有名气)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢,我的实验已经出结果了,加入顺序无所谓,我是先加了水,后加的酶等。
我也是最后加TAG,一般都是从量大的开始加。不过少量加入的话一定要加到液面以下,这样才放心阿。
做懂得生活的人
10楼2008-05-03 22:33:10
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):鼓励!
(水,dNTP,Taq,buffer,MgCl2,引物)按顺序混合后在每管分装,然后加cDNA。我是这样做的。
一般OD260值在0.2就够浓度了。

[ Last edited by jurkat.1640 on 2008-5-3 at 12:04 ]
2楼2008-05-03 12:03:02
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passion_jh

铜虫 (初入文坛)

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):鼓励!
我基本是最后加Taq的
3楼2008-05-03 13:22:18
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江流儿

木虫 (正式写手)

最后加Taq,其他无所谓吧
最好先加便宜的
4楼2008-05-03 15:40:38
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