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我的工大

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 各位前辈大家好,现有一色谱问题讨教各位大神,现检测一物质但液相色谱峰不好 已有6人参与

先简单介绍一下检测物质,检测的两个物质都是二元弱酸,第一个峰的弱酸电离常数pKa1=1.92,pka2=6.27,紫外特征吸收波长为209nm;第二个峰的弱酸电离常数pKa1=3.03,pKa2=4.04,紫外特征吸收波长为211nm.
色谱条件:色谱柱:型号ZORBAX SB-C18(色谱柱规格4.6*150mm  5um);检测器:UV;检测波长:210nm;流速:1mL/min;流动相:甲醇:磷酸溶液(v/v,体积比)=3:97(磷酸溶液是含千分之一85%磷酸的水溶液)磷酸溶液pH=2.123。
先需向大家请教的是:我的一号峰拖尾总是很严重,希望大家给点建议,看看能不能帮小生解决拖尾问题,小生再次谢谢大家了。

各位前辈大家好,现有一色谱问题讨教各位大神,现检测一物质但液相色谱峰不好
IMG_20141006_192228.jpg
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品过载了,稀释5倍进样看看。这个条件基本可以,如果觉得保留性太低,可以考虑:1.换柱子,可以用氰基、氨基、HILIC柱等试试;2.加离子对试剂;3.可以考虑用高氯酸替换磷酸。
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
4楼2014-10-17 08:58:13
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我的工大: 金币+1, ★★★很有帮助, 建议比较中肯,谢谢您的建议:-P 2014-10-16 23:46:19
我的工大: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-10-18 21:38:44
楼主这个麻烦了 估计把pH跳上来 第二个峰又会拖尾,不然可以试试把pH调到4左右时 第一个峰应该就不会这么严重的拖尾了 或者加大磷酸浓度 调到3%试试看  SB-C18的柱子 耐低pH 可低至1.0
归零
2楼2014-10-16 23:15:36
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longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你浓度太高了,峰高都超3000了,已经超载,溶剂效应会很强,我估计这是你目前峰拖尾的一个原因。
降低浓度,降低进样量试试。
建议你使用小粒径柱子,这有利于分离极性大的物质。
还有一个终极办法:加阴离子对试剂,呵呵,这个除非没办法最好别用。
3楼2014-10-17 08:57:12
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
我的工大: 金币+1, 有帮助 2014-10-18 21:38:29
浓度进的太大了 稀释50倍试试 柱子有没有SB-Aq柱 这个柱子可以用纯水相做流动相 流动相pH调到2.5左右试试 用磷酸钾缓冲液试试
5楼2014-10-17 09:19:56
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