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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 半制备高效液相柱子10x250mml上样体积最多有多少？
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cxw1027

金虫 (正式写手)

旅行

[求助] 半制备高效液相柱子10x250mml上样体积最多有多少？ 已有1人参与

我最近在做的一个东东溶解度不太好，大概在流动相溶剂中浓度最多能达到5mg/ml的样子，使用的半制备高效液相配了一个1ml的样品环，因为样品比较珍贵，想问问进多少体积的样品能达到最大的分离效率和最小损失？
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努力、上进
1楼 2014-10-16 16:21:36
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5mg/mL的溶解度还算可以，进样体积多少是看峰分得开不开，分得开可以多进一点，一般来说，10mm内径的柱子进200μL这样。

还有你的样品总共有多少毫克？如果是15mg以上，最后搜集到的样品肯定足够打谱

建议你先进样50μL，试一次，然后慢慢增大进样量
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cxw1027
2楼2014-10-16 16:40:26
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cxw1027

金虫 (正式写手)

旅行
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by torekill at 2014-10-16 16:40:26
5mg/mL的溶解度还算可以，进样体积多少是看峰分得开不开，分得开可以多进一点，一般来说，10mm内径的柱子进200μL这样。

还有你的样品总共有多少毫克？如果是15mg以上，最后搜集到的样品肯定足够打谱

建议你先 ...

要进的样品是许6个微量化合物的混合物，总量大概有70mg，进样10微升的时候大概能够达到基线分离。
样品里面还混有70mg左右的一个杂质，是在上次富集时没有清除完全留下的，考虑到这个大杂质的处理，是否应该再在常规柱上处理一下再进行制备？
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努力、上进
3楼2014-10-16 16:57:39
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

杂质的量很大吗？如果大到影响分离就要先去掉，或者保留时间太长，严重影响分离效率就要去掉   

分析柱上能达到基线分离的话，10mm制备柱上也能达到，就是看保留时间差别大不大     稍微大一点就接得纯
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4楼2014-10-16 17:19:25
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cxw1027

金虫 (正式写手)

旅行
引用回帖:
4楼: Originally posted by torekill at 2014-10-16 17:19:25
杂质的量很大吗？如果大到影响分离就要先去掉，或者保留时间太长，严重影响分离效率就要去掉   

分析柱上能达到基线分离的话，10mm制备柱上也能达到，就是看保留时间差别大不大     稍微大一点就接得纯

先进0.1ml看一下分离情况。
另外，还有一个问题不太懂——在资料中看到“如果使用样品环，进样量需大于样品环容量的3~5倍”多余出来的样品是不是直接流掉损失了？“不使用样品环时，进样量小于样品环容量的1/2”是不是在这种情况下才能达到最好的分离？
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努力、上进
5楼2014-10-16 17:49:14
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cxw1027: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-10-16 20:56:44
引用回帖:
5楼: Originally posted by cxw1027 at 2014-10-16 17:49:14
先进0.1ml看一下分离情况。
另外，还有一个问题不太懂——在资料中看到“如果使用样品环，进样量需大于样品环容量的3~5倍”多余出来的样品是不是直接流掉损失了？“不使用样品环时，进样量小于样品环容量的1/2”是 ...

这都是说的分析，制备不管这种
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6楼2014-10-16 18:21:10
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cxw1027

金虫 (正式写手)

旅行
引用回帖:
6楼: Originally posted by torekill at 2014-10-16 18:21:10
这都是说的分析，制备不管这种...

补充问一下，为什么满刻度进样需要进样品环体积的3~5倍？
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努力、上进
7楼2014-10-17 11:16:10
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wood9818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cxw1027 at 2014-10-17 11:16:10
补充问一下，为什么满刻度进样需要进样品环体积的3~5倍？...

相当于冲洗置换样品环中溶剂

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8楼2015-01-02 06:36:33
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