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cyanobacter金虫 (小有名气)
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[求助]
用CFP和YFP做FRET，但是CFP和YFP出现串色是什么原因？
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各位虫友，大家好，我最近在构建FRET的表达质粒，遇到一个问题。 我用CFP和YFP先分别在细胞中表达，然后用激光共聚焦观察，可是很奇怪，CFP在自己的激发波长433nm下看不到荧光，需要先用紫外365nm照一会儿，再转到CFP的通道（激发433nm，发射476nm）才能看到荧光。 同样YFP也是这样，需要先转到紫外通道照一会，然后再用YFP的通道看能看到明显的荧光，单独只用YFP的通道也看不到。 请问各位虫友又遇到过这种情况吗？是什么原因导致这种情况，如果都需用紫外来激发的话，那FRET也就没法做了。请大家帮忙啊！ |
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