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humants金虫 (正式写手)
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【求助】质粒提不出来
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我最近打算做PC扩增目的基因，引物都来了，却发现目的基因提不出来了，老板还催着，着急啊。 我的目的基因所用的载体是invitrogen的pcDNA3.1/ZEO(+)，其上面用的Ori是PUC origin ,我看文献上说这种复制子拷贝数能到100多，但是除了第一次转化完了，用保存完菌种剩下的提出来了一次，以后提了三次除了RNA什么都没有。 我问老师他说可能是抗生素失效了，于是我就用无抗性的DH5Α做了一次抗生素对照,结果什么都没长，抗生素没问题，我实在想不出别的原因了，还不好意思去问老师，还请各位虫友给以指点，不胜感激。 载体图谱： （附件中也有） http://tools.invitrogen.com/cont ... pcdna3.1zeo_map.pdf [search]质粒，拷贝数[/search] |
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