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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC外标法含量测定究竟怎么测呀？搞不懂啊~~
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Snuggle安

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC外标法含量测定究竟怎么测呀？搞不懂啊~~ 已有4人参与

高效液相用外标法测定含量，查了一下，有的说代入标准曲线算出对应的就可以了，有的还需要计算F值，还有一个公式是C(x)=C(R)*A(x)/A(R)
我想问问大家它们是不同的两种方法，还是怎么样？不用公式，直接代入标曲算不行么？有什么影响
实在搞不懂啦~先谢谢各位了~
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1楼 2014-10-10 16:36:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

七喜丸子

金虫 (小有名气)

一枚苦逼的搬砖民工

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-11 23:49:53
外标很easy，内标相对复杂，不过外标的前提是你得有纯度很高的标准品～

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Keelahse'lai
4楼2014-10-10 22:06:56
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普通回帖

Snuggle安

新虫 (初入文坛)
大家来帮帮忙~
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2楼2014-10-10 16:39:20
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果标曲是同一天24小时内的 可以直接根据标曲计算的，如果不是的话建议进一个单点外标来计算。C(x)=C(R)*A(x)/A(R)就是直接使用单点外标法计算的公式。x表示未知样品，R表示对照品，C表示浓度，A表示峰面积（或响应值）
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归零
3楼2014-10-10 19:38:13
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xiuxiu6809

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-11 23:49:59
f值就是你后面公式里的Cr/Cx，这就是外标法的公式。一般实验的时候，先称两份对照品，每份测三次，得到各自的峰面积Ar，然后就得到了f值，再测你样品的峰面积Ax。代入公式就得到了你的样品浓度。一般所配样品浓度和对照品浓度相同，便于计算，不懂再问哦。

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5楼2014-10-11 08:44:58
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Snuggle安

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by klicking at 2014-10-10 19:38:13
如果标曲是同一天24小时内的 可以直接根据标曲计算的，如果不是的话建议进一个单点外标来计算。C(x)=C(R)*A(x)/A(R)就是直接使用单点外标法计算的公式。x表示未知样品，R表示对照品，C表示浓度，A表示峰面积（或响应 ...

意思就是两种方法都可以计算吗？那算出的结果有什么差别呢？
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6楼2014-10-11 19:46:06
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Snuggle安

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiuxiu6809 at 2014-10-11 08:44:58
f值就是你后面公式里的Cr/Cx，这就是外标法的公式。一般实验的时候，先称两份对照品，每份测三次，得到各自的峰面积Ar，然后就得到了f值，再测你样品的峰面积Ax。代入公式就得到了你的样品浓度。一般所配样品浓度和 ...

这个和标准曲线法有什么差别？公式的这个方法还是有点蒙，我直接用标准曲线算行吗
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7楼2014-10-11 19:47:50
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-11 23:50:07
引用回帖:
6楼: Originally posted by Snuggle安 at 2014-10-11 19:46:06
意思就是两种方法都可以计算吗？那算出的结果有什么差别呢？...

基本无差别 结果偏差应在2个百分点以内
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归零
8楼2014-10-11 19:52:15
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xiuxiu6809

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-11 23:50:12
Snuggle安: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-10-13 09:07:58
引用回帖:
7楼: Originally posted by Snuggle安 at 2014-10-11 19:47:50
这个和标准曲线法有什么差别？公式的这个方法还是有点蒙，我直接用标准曲线算行吗...

看看色谱书定量计算那一块都有详细讲解几种计算方法，标曲是其中一个而已。如果你有成熟的定量分析方法就用外标法来测，如果你要做方法学，也就是建立一个可行的定量分析方法时用标曲。 我不清楚你现在具体的目的是什么

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9楼2014-10-11 22:21:23
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liwenchun

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
主要看标准曲线的截距，截距小的也就是曲线近似过0点，采用两种方法计算差别不大，如曲线不过原点时且截距过大，就要考虑两点法了。一点法只是认为另外一点是原点(0，0)而已。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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10楼2014-10-12 08:42:42
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