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肿瘤干细胞培养遇到问题了，望众多虫友不吝赐教！ 已有2人参与
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养肿瘤干细胞的前辈们，lz培养大肠癌干细胞遇到一些问题，不知道你们以前遇到过吗？ 1、不加血清的培基分离肿瘤干细胞：由于干细胞只是很小一部分，种到培养瓶中的细胞大多数都要死亡，只有少数自我更新成球。原代培养肿瘤干细胞长得时间比较长，我的培养瓶中会出现黑色圆圆的东西，培基还是很清澈的，那些是细胞碎片吗？大家原代细胞状态是怎么样的？ 1.用不加血清的培基分离肿瘤干细胞后，3-5天成球，一周后我传代种板做细胞试验，但问题是传代后，培养瓶细胞长得很慢，死细胞也很多，是消化损伤到干细胞造成的吗？（我是这样传代的，先收集悬浮细胞，800r/min离心5min，弃上清，PBS重悬清洗，再离心弃上清，加0.05%TE消化30秒，终止消化，离心用不含血清的全培重悬，然后接种到培养瓶中和用于细胞试验。）你们是怎么传代的？ 2、细胞试验中，96孔板里面细胞只长48h，这样短的时间传代的细胞正常生长是什么状态呢？应该不能成球吧，我检测的不加药的细胞活性很低很低，真是伤心啊！是哪里出问题了呢？ |
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