应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 大肠杆菌的活化
202/2返回列表上一页12
查看: 4297  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

selt

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接LB平板划线培养20h左右就可以了呀，我们一般不用涂布棒的，用灭菌枪头吸菌液后划线，不用担心会烫死。
赞一下 回复此楼
11楼2014-10-08 09:35:09
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈_劼_翔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
夏夜微风: 金币+1 2014-10-08 14:06:17
棉塞用的棉花要是非脱脂棉，脱脂棉透气性不好。涂布没菌可能稀释倍数不对，可以镜检用计数板计数帮助判断到底要稀释多少倍。如果不是为了计数，直接用接种环沾发酵液划线就行。
赞一下 回复此楼
这是签名~
12楼2014-10-08 10:58:06
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馨-馨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
夏夜微风: 金币+1 2014-10-08 14:05:26
引用回帖:
5楼: Originally posted by 夏夜微风 at 2014-10-07 23:11:11
涂布烫死倒是确定不会。
制备LB液体培养基和LB固体培养基是同时的，只是在加琼脂的时候分开了，一半加琼脂一半不加琼脂。从液体培养基中直接取原菌液（不稀释）进行涂布是不是对菌体的生长有影响啊？...

看你这样说，你的培养基肯定是不加抗生素的，那么，你培养时间48h,时间太长了，可能会染菌；还有你直接用液体培养的菌涂板，菌浓度过高，一般都是要稀释后才能涂板，或者是直接采用划线分离单菌落。
个人建议，你从-80拿出来的菌，直接通过连续的几次划线分离单菌落后，在液体培养就可以了。
赞一下 回复此楼
13楼2014-10-08 13:04:54
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏夜微风

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 馨-馨 at 2014-10-08 13:04:54
看你这样说，你的培养基肯定是不加抗生素的，那么，你培养时间48h,时间太长了，可能会染菌；还有你直接用液体培养的菌涂板，菌浓度过高，一般都是要稀释后才能涂板，或者是直接采用划线分离单菌落。
个人建议，你 ...

我也觉得要稀释，今早就做了个划线培养，菌还没有长出来。
赞一下 回复此楼
还未成熟，就已老去！
14楼2014-10-08 14:05:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏夜微风

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 陈_劼_翔 at 2014-10-08 10:58:06
棉塞用的棉花要是非脱脂棉，脱脂棉透气性不好。涂布没菌可能稀释倍数不对，可以镜检用计数板计数帮助判断到底要稀释多少倍。如果不是为了计数，直接用接种环沾发酵液划线就行。

嗯，试试看。
回复此楼
还未成熟，就已老去！
15楼2014-10-08 14:06:13
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏夜微风

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by selt at 2014-10-08 09:35:09
直接LB平板划线培养20h左右就可以了呀，我们一般不用涂布棒的，用灭菌枪头吸菌液后划线，不用担心会烫死。

用灭菌枪头吸菌液划线？不能用接种环直接沾菌液划线吗？
赞一下 回复此楼
还未成熟，就已老去！
16楼2014-10-08 14:07:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿里郎爱阿里

铜虫 (正式写手)
长时间保存的菌种复苏还是直接接液体培养基的好，大肠杆菌48小时还没长起来说明活性已经很低了。不知道你取了多少菌液涂布，建议这种情况可以多加一些。另外，确定你活化的时候取的100微升是菌液而不只是甘油？
赞一下 回复此楼
17楼2014-10-09 11:21:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

selt

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 夏夜微风 at 2014-10-08 14:07:45
用灭菌枪头吸菌液划线？不能用接种环直接沾菌液划线吗？...

可以呀，只是接种环要烧，可能会把菌烫死，而且也麻烦。
赞一下 回复此楼
18楼2014-10-09 11:56:38
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏夜微风

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 阿里郎爱阿里 at 2014-10-09 11:21:02
长时间保存的菌种复苏还是直接接液体培养基的好，大肠杆菌48小时还没长起来说明活性已经很低了。不知道你取了多少菌液涂布，建议这种情况可以多加一些。另外，确定你活化的时候取的100微升是菌液而不只是甘油？

我是拿甘油菌直接在平板上涂布，长出菌体后再取单菌落菌进行划线，然后再取单菌落进行斜面，最后用斜面菌一环进行液体培养，37℃，200r/min，分别取培养了8h，10h，24h的菌50ul进行平板涂布，培养过夜不长菌，24h也不长菌。
赞一下 回复此楼
还未成熟，就已老去！
19楼2014-10-09 14:08:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流水不争

铁杆木虫 (正式写手)

小木虫

【答案】应助回帖

甘油管里的菌划线 活化 不充分 建议用液体 LB
赞一下 回复此楼
20楼2015-01-24 10:15:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 夏夜微风 的主题更新
202/2返回列表上一页12
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭