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森林培育

银虫 (小有名气)

[求助] 请教银杏高质量DNA提取问题 已有2人参与

有人提取过高质量(可用于建库)的银杏叶片(成熟)DNA么?用的什么方法,做了哪些改动,请高手赐教,谢谢!本人用CTAB法提过幼嫩的叶片,但提成熟叶片和果子在加25:24:1离心后上层总是出现凝胶状,Nano drop检测含量100ng/ul以下,且260/230为1.5以下。也用过天根DNA试剂盒,效果也不好。
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)


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6楼: Originally posted by 森林培育 at 2014-09-29 17:58:16
用同样方法提取其他材料(茶、水稻等)效果都很好,洗脱液已经加的很少了。...

银杏好像是多糖多酚植物吧?你换个公司的试剂盒试试
7楼2014-09-29 18:04:46
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用公司试剂盒提取效果不好是不好在哪一点?提取浓度达不到要求 还是260/230比值不行?
2楼2014-09-29 15:43:27
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森林培育

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-09-29 15:43:27
用公司试剂盒提取效果不好是不好在哪一点?提取浓度达不到要求 还是260/230比值不行?

浓度低于50ng/ul,比值也不好。
前进很迷人
3楼2014-09-29 17:13:39
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼: Originally posted by 森林培育 at 2014-09-29 17:13:39
浓度低于50ng/ul,比值也不好。...

洗脱核酸的时候少加三分之一到一半的洗脱液,这样可以适当提高浓度。如果260/230比值不好,可能是WB洗脱那步有问题,检查一下乙醇是不是没加够。
4楼2014-09-29 17:26:58
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