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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请教银杏高质量DNA提取问题
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森林培育

银虫 (小有名气)

[求助] 请教银杏高质量DNA提取问题 已有2人参与

有人提取过高质量（可用于建库）的银杏叶片（成熟）DNA么？用的什么方法，做了哪些改动，请高手赐教，谢谢！本人用CTAB法提过幼嫩的叶片，但提成熟叶片和果子在加25:24:1离心后上层总是出现凝胶状，Nano drop检测含量100ng/ul以下，且260/230为1.5以下。也用过天根DNA试剂盒，效果也不好。
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前进很迷人
1楼 2014-09-29 14:31:11
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by 森林培育 at 2014-09-29 17:58:16
用同样方法提取其他材料（茶、水稻等）效果都很好，洗脱液已经加的很少了。...

银杏好像是多糖多酚植物吧？你换个公司的试剂盒试试
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7楼2014-09-29 18:04:46
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)
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用公司试剂盒提取效果不好是不好在哪一点？提取浓度达不到要求 还是260/230比值不行？
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2楼2014-09-29 15:43:27
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森林培育

银虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-09-29 15:43:27
用公司试剂盒提取效果不好是不好在哪一点？提取浓度达不到要求 还是260/230比值不行？

浓度低于50ng/ul，比值也不好。
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前进很迷人
3楼2014-09-29 17:13:39
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 森林培育 at 2014-09-29 17:13:39
浓度低于50ng/ul，比值也不好。...

洗脱核酸的时候少加三分之一到一半的洗脱液，这样可以适当提高浓度。如果260/230比值不好，可能是WB洗脱那步有问题，检查一下乙醇是不是没加够。
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4楼2014-09-29 17:26:58
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