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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请教银杏高质量DNA提取问题
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森林培育

银虫 (小有名气)

[求助] 请教银杏高质量DNA提取问题 已有2人参与

有人提取过高质量（可用于建库）的银杏叶片（成熟）DNA么？用的什么方法，做了哪些改动，请高手赐教，谢谢！本人用CTAB法提过幼嫩的叶片，但提成熟叶片和果子在加25:24:1离心后上层总是出现凝胶状，Nano drop检测含量100ng/ul以下，且260/230为1.5以下。也用过天根DNA试剂盒，效果也不好。
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前进很迷人
1楼 2014-09-29 14:31:11
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 森林培育 at 2014-09-29 17:13:39
浓度低于50ng/ul，比值也不好。...

洗脱核酸的时候少加三分之一到一半的洗脱液，这样可以适当提高浓度。如果260/230比值不好，可能是WB洗脱那步有问题，检查一下乙醇是不是没加够。
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4楼2014-09-29 17:26:58
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用公司试剂盒提取效果不好是不好在哪一点？提取浓度达不到要求 还是260/230比值不行？
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2楼2014-09-29 15:43:27
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森林培育

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-09-29 15:43:27
用公司试剂盒提取效果不好是不好在哪一点？提取浓度达不到要求 还是260/230比值不行？

浓度低于50ng/ul，比值也不好。
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前进很迷人
3楼2014-09-29 17:13:39
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shouyiweida

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-29 19:46:57
我看过很多改良CTAB提取法，其中此法我是我试过最好用的，效果确实不错，你可以试试，希望也好用。
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  • 附件 1 : 一种改良的CTAB法提取产多糖真菌DNA_刘丽.pdf
    • 2014-09-29 17:50:52, 280.03 K
5楼2014-09-29 17:51:37
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