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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » BL21 感受态在含kan平皿中生长，液体不生长
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] BL21 感受态在含kan平皿中生长，液体不生长 已有2人参与

BL21感受态 涂布在含kan平皿上生长出几个菌落， 在液体中不生长。。   BL21--（不是感受态，空宿主）在LB液体培养基中 生长， 在LB液体培养基（含kana）中不生长， 是什么原因呢，   而且转化后， 平皿中的菌落培养后， 有抗性，就是提取不出来质粒，  质粒使用试剂盒。
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12
1楼 2014-09-27 16:52:19
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-27 22:32:47
永峰1230: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-09-28 11:42:30
BL21，空菌应该是没有抗性的。感受态涂布在kan平皿上长几个菌落的，首先你制备感受态的菌是不是不纯啊，长的可能是杂菌；质粒提不出来的情况分析一下你转进的质粒是否为低拷贝质粒。
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2楼2014-09-27 19:59:43
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cuihao102 at 2014-09-27 19:59:43
BL21，空菌应该是没有抗性的。感受态涂布在kan平皿上长几个菌落的，首先你制备感受态的菌是不是不纯啊，长的可能是杂菌；质粒提不出来的情况分析一下你转进的质粒是否为低拷贝质粒。

pet28a (+)质粒，
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12
3楼2014-09-28 10:30:04
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-09-28 10:30:04
pet28a (+)质粒，...

这几天正做着这个质粒呢，之前用1.5ml菌液提的质粒也是特别少，电泳看不清，提了几次都这样，后来没办法摇了50ml菌液提质粒，加500微升TE溶解，才能往下做。
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4楼2014-09-28 10:38:50
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smdsfy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永峰1230: 金币+3, ★有帮助 2014-09-29 11:08:36
感受态有问题，建议换一下吧，
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5楼2014-09-28 13:30:34
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