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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 大肠杆菌RED基因敲除4个月总是得不到阳性克隆，求大神指导！！！
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llp1030

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌RED基因敲除4个月总是得不到阳性克隆，求大神指导！！！

最近一直在做大肠杆菌的基因敲除，可是4个月一个基因都没敲下来，总是电转后得不到阳性克隆，也就是说抗性片段没有整合到染色体上，卡在这一步！！！
制取的片段应该没有问题，感受态制作是大肠杆菌K12（PKD46），电击条件：2.5KV,5ms,2mm电转杯，电击后37度后培养1.5小时涂板，可是长出的单菌落都是假阳性的。
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1楼 2014-09-25 20:05:48
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llp1030

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 林默泪 at 2014-10-21 09:55:17
您好，我想和您交换或者购买K12这个菌株，可以吗?

亲，你是要拿什么交换K12菌株？
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3楼2014-10-27 20:21:25
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林默泪

新虫 (初入文坛)
您好，我想和您交换或者购买K12这个菌株，可以吗?
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-21 09:55:17
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