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yinyongtai

新虫 (初入文坛)

[交流] 晒晒 你做亚细胞定位的方法, 基因编码框or启动子区 已有1人参与

研究一个基因的亚细胞定位，有些文献是用编码区， 有些文献用的启动子区，请问各路豪杰，两种方法有什么区别吗？
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1楼 2014-09-22 14:42:12
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yinyongtai

新虫 (初入文坛)
没说清楚，是这样的：
克隆到一个植物新基因，不知道基因在哪里表达，
看到有写文献是用 【35S 启动子】——【新基因的CDS区】——GFP， 转化原生质体；
有些文献是将 【新基因的启动子】——GFP, 转化原生质体；
然后检测荧光信号。
请问有什么不同？
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2楼2014-09-24 11:35:33
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sun_in_night

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果看在植株的具体哪个部位表达，一般用native promoter+report gene(GUS, GFP...)。
如果看亚细胞定位，一般用native promoter+ CDS +C/N-GFP, 不大可能不加你的蛋白直接看亚细胞定位，因为蛋白上会有影响定位的信号肽。
但有的时候native promoter的信号太低，就会退而求其次用35S或其他过量表达的promoter
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3楼2014-09-26 20:51:49
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