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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 请问拟南芥CS系列的突变体怎么鉴定纯合体？
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小孽博士

新虫 (小有名气)

[求助] 请问拟南芥CS系列的突变体怎么鉴定纯合体？ 已有3人参与

ABRC上订了一个突变体，是单个碱基突变，CS系列的，有虫友知道怎么鉴定纯合体吗？以前只鉴定过T-DNA插入的突变体。不胜感激~
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千磨万击还坚劲，任尔东西南北风
1楼 2014-09-13 20:05:45
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泊头人

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-15 08:33:13
引用回帖:
11楼: Originally posted by 小孽博士 at 2014-09-14 20:14:27
有引物，但是我还是不知道怎么鉴定，你是怎么做的？...

不知道你的情况是什么   我们是有3个引物   把他们与基因全都加到同一个PCR管中做PCR  如果有一条带就是纯合的  两条的就是杂合的  并且还要看看是不是在预期范围内
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好好学习天天向上
12楼2014-09-14 22:59:33
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akaliusi

铜虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-09-14 09:19:09
没做过这方面工作

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
岂能介入任意，但求无愧我心
2楼2014-09-14 00:58:30
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
★ ★
小孽博士(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-14 09:19:35
先看下ABRC的基因型是不是纯合子，是纯合子就不要鉴定了，如果是杂合子的话，你看下它有没有提供两端的侧翼序列，能不能找到这个突变位点，再看下这个突变位点有没有因为一个碱基的变化产生了一个酶切位点或者缺失了一个酶切位点，然后设计一段引物去扩增，再进行酶切验证。如果没有产生或者缺失酶切位点，我也不知道怎么进行纯合子鉴定。
赞一下(2人) 回复此楼
。
3楼2014-09-14 08:30:22
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你买的时候是应该知道侧翼序列的，
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-14 09:51:24
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