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好孩子5521

新虫 (初入文坛)

[求助] 亚细胞定位 已有1人参与

小虫刚接触分子实验不久,需要做亚细胞定位,转化洋葱表皮细胞,一头雾水,不知从何下手,还请高手指点!!!多谢!!!(ps. 刚来小木虫,金币也不多,大家帮帮忙
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越努力越幸运O(∩_∩)O
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)


好孩子5521(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-11 09:23:02
先找一个转化洋葱表皮细胞的载体,你可以去看下人家的文章是用什么载体,然后把自己的片段和载体进行构建成重组载体,再通过基因枪打入表皮细胞。
2楼2014-09-10 19:48:15
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

你有载体了吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
3楼2014-09-10 23:46:05
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
找做的人看一遍,最好打个下手,新学的要学会问,学会请教,学会帮忙,这样对自己没坏处的,靠自己摸要走很多弯路的
4楼2014-09-11 08:24:56
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好孩子5521

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2014-09-10 19:48:15
先找一个转化洋葱表皮细胞的载体,你可以去看下人家的文章是用什么载体,然后把自己的片段和载体进行构建成重组载体,再通过基因枪打入表皮细胞。

谢谢!大体的实验流程我也知道,但是细节方面就不理解了。也不知道怎么选择载体,有什么选择条件吗
越努力越幸运O(∩_∩)O
5楼2014-09-11 11:41:50
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好孩子5521

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lijianfu12 at 2014-09-10 23:46:05
你有载体了吗?

还没呢,我看文献都是用的不一样的载体,我自己也不会选择。载体是不是跟内参基因差不多,都是通用的呢?
越努力越幸运O(∩_∩)O
6楼2014-09-11 11:43:06
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 好孩子5521 at 2014-09-11 11:43:06
还没呢,我看文献都是用的不一样的载体,我自己也不会选择。载体是不是跟内参基因差不多,都是通用的呢?...

一般带GFP标签的植物表达载体就可以呀!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
7楼2014-09-11 11:44:31
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好孩子5521

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-11 08:24:56
找做的人看一遍,最好打个下手,新学的要学会问,学会请教,学会帮忙,这样对自己没坏处的,靠自己摸要走很多弯路的

嗯嗯,谢谢。正是因为实验室这边还没有找到做这个实验的同学,我才求助小木虫的。
越努力越幸运O(∩_∩)O
8楼2014-09-11 11:46:00
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bwangel

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 好孩子5521 at 2014-09-11 11:46:00
嗯嗯,谢谢。正是因为实验室这边还没有找到做这个实验的同学,我才求助小木虫的。...

那我教你,你去下载一篇做亚细胞定位相关的博士论文,材料方法里一定有介绍,
9楼2014-09-11 13:31:33
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