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huangk1199

木虫 (正式写手)

[求助] CTC, DAPI, CFDA 染色问题求教

刚摸索荧光显微镜使用,对复杂环境样品(污泥和堆肥产物)染色,所有步骤均按照药品kit的操作说明,问题求教,
1. CTC 可以染呼吸活细胞,UV 下红色;DAPI 染活细胞+死细胞的DNA,UV灯下蓝色。问题是,若一个活细胞被CTC和DAPI同时染色后,理论上在UV下发出红色+蓝色,但实际上能看到一个细胞被两种染色剂染上吗?如果被在UV下,低倍率观察,一个细胞有红+蓝,这个时候的颜色又是什么颜色?
2. 理论上是CFDA染活细胞显绿色,DAPI 染全细胞显红色,但是为啥经常观察的结果是绿色的数量大于蓝色的?这个不解。
3. CFDA和DAPI混染后,DAPI的背景过重,如何处理,用PBS or 无菌水漂洗,哪个好?

[ Last edited by 红舟流星 on 2014-9-10 at 00:57 ]
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一路蚯蚓
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likedong1021

木虫 (著名写手)

你的样品太复杂,恐怕染的是什么都很难区分吧?
大家都走的路并不一定适合你,遭他人侧目有两种可能,一种是你疯了,一种是他们疯了
2楼2014-09-11 19:48:06
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