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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » CTC， DAPI, CFDA 染色问题求教
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huangk1199

木虫 (正式写手)

[求助] CTC， DAPI, CFDA 染色问题求教

刚摸索荧光显微镜使用，对复杂环境样品（污泥和堆肥产物）染色，所有步骤均按照药品kit的操作说明，问题求教，
1. CTC 可以染呼吸活细胞，UV 下红色；DAPI 染活细胞+死细胞的DNA，UV灯下蓝色。问题是，若一个活细胞被CTC和DAPI同时染色后，理论上在UV下发出红色+蓝色，但实际上能看到一个细胞被两种染色剂染上吗？如果被在UV下，低倍率观察，一个细胞有红+蓝，这个时候的颜色又是什么颜色？
2. 理论上是CFDA染活细胞显绿色，DAPI 染全细胞显红色，但是为啥经常观察的结果是绿色的数量大于蓝色的？这个不解。
3. CFDA和DAPI混染后，DAPI的背景过重，如何处理，用PBS or 无菌水漂洗，哪个好？

[ Last edited by 红舟流星 on 2014-9-10 at 00:57 ]
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一路蚯蚓
1楼 2014-09-09 17:20:21
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likedong1021

木虫 (著名写手)
你的样品太复杂，恐怕染的是什么都很难区分吧？
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大家都走的路并不一定适合你，遭他人侧目有两种可能，一种是你疯了，一种是他们疯了
2楼2014-09-11 19:48:06
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