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关于方法学验证-耐用性问题 已有4人参与
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现在做的一个项目，做方法学验证-耐用性时遇到一些问题，请有经验的大神帮忙解答一下。 耐用性-是否：不同波长、不同流速、不同柱温、不同柱子、不同流动相PH（涉及到的话）、不同流动相比例（涉及到的话）都要做？ 比如有关物质方法， 流动相A：甲醇-0.02mol/L戊烷磺酸钠的0.5%硫酸铵溶液（2M盐酸调pH至2.00）=10:90； 流动相B：甲醇； 流速1.0ml/min，进样量20μl，检测波长205nm； 色谱柱 柱温30℃ 梯度设置： 时间min 流动相A 流动相B 0 100 0 25 100 0 35 35 65 55 35 65 60 100 0 70 100 0 问题：1.我的方法不耐用，调整比例和pH后，杂质可能分离度不好，是否必须做不同流动相PH、不同流动相比例，不做是否漏项 2.做的话，结果不好，是否可以解释 3.如果我的样品非常不稳定，耐用性如果计算杂质含量的话，做起来需要的时间比较长，是否可以有关物质耐用性，用加主成分的混标做各个条件，然后计算各条件下的相对保留时间和分离度（同事说见过这样做的）？ |
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