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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 活化菌提质粒碰到的奇怪问题 已有5人参与

我有自己构建的2个菌株A,B。
我挑单克隆后提质粒挺好的,大约300ng/ul。
但是我保存菌后的一个月后再提质粒,却是30ng/ul。

之后我重新转化质粒,挑单克隆,提质粒,大约300ng/ul。同时把这次的菌保存了。
但是我用这次保存菌后的10后再提质粒,却是20ng/ul。
同批提取的质粒很正常,400ng/ul。

求问:这是为什么呢?因为质粒太大了?还是污染了?还是别的什么原因?
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dulei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+1, 有帮助 2014-09-10 15:25:50
能用就行了?要那么浓干吗?

你提取的菌液量是不是一样?菌浓是不是一样?如果这两个都一样,那你抗生素的浓度是不是够?不够的话,质粒不稳定。
大质粒(>10k),用试剂盒提出的浓度低,可以改成手提。

排除以上问题。如果是新手,严重怀疑操作上的问题。如果不是新手,根本不会有这个疑问。
2楼2014-09-10 12:57:48
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